Identificaci�n de la flora bacteriana del
tracto digestivo de
anodontites trapesialis por coloraci�n gram
Juvenal Napuchi-Linares1
Laura Acosta-Mendoza1
1Universidad Nacional Aut�noma de Alto Amazonas � Facultad de Zootecnia, Agronom�a Y Ciencias Biol�gicas Y Acuicultura.
Yurimaguas � Per�.
RESUMEN.
El trabajo se realiz� en el Laboratorio de Biolog�a de la Universidad Nacional Aut�noma De Alto Amazonas en la ciudad de Yurimaguas con el prop�sito de establecer si era posible identificar mediante el m�todo de Tinci�n Gram la presencia de agentes pat�genos que fueran capaces de ocasionar da�os a la salud del ser humano como consumidor directo. Para ello se obtuvo 10 ejemplares de Anodontites trapesialis (tumbacuchara) de un mercado local, esto nos indicaba de con seguridad que dichos ejemplares eran destinados al consumo humano directo. De cada ejemplar se tomaron 3 muestras (boca, estomago e intestino) haciendo un total de 30 muestras a evaluar. Durante la experimentaci�n solo se pudo observar bacilos Gram Positivos en muestras de boca de algunos ejemplares sin poder identificar a nivel gen�rico ni especifico lo cual es indicativo de que el m�todo de Tinci�n De Gram no es el adecuado para la identificaci�n de flora bacteriana del tracto digestivo de tumbacuchara.
Palabras Clave: flora bacteriana; tinci�n gram; anodontites trapesialis
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Identification of the bacterial flora of the digestive tract of
anodontites trapesialis by gram staining
ABSTRACT
The work was carried out in the Biology Laboratory of the National Autonomous University of Alto Amazonas during the months of October to December of the year 2018 in Yurimaguas City with the purpose of establishing if it was possible to identify by means of the Gram Tincion method the presence of pathogenic agents that were capable of causing damage to human health as a direct consumer. For this, 10 specimens of Anodontites trapesialis (tumbacuchara) were obtained from a local market, this indicated to us with certainty that these specimens were destined for direct consumption. From each specimen, 3 samples were taken (mouth, stomach and intestine) making a total of 30 samples to be evaluated. During the experiment, only Gram-positive bacilli could be observed in mouth samples of some specimens without being able to identify at a generic or specific level, which is indicative that the Gram Tincion method is not adequate for the identification of bacterial flora of the digestive tract. from tumbacuchara.
Keywords: bacterial flora; gram stain; anodontites trapesialis
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Art�culo recibido:� 05 octubre. 2021
Aceptado para publicaci�n: 02 noviembre 2021
Correspondencia: [email protected]
Conflictos de Inter�s: Ninguna que declarar
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INTRODUCCI�N
En la regi�n Amaz�nica, el potencial de recursos hidrobiol�gicos es bastante elevado, pues existen una gran variedad de peces, moluscos y crust�ceos, de los cuales, los peces y moluscos, representan una gran alternativa para su aprovechamiento a nivel industrial, pues se adaptan f�cilmente a la crianza en cautiverio y su reproducci�n es abundante (Cortez, 1988).
Los moluscos de agua dulce son un componente clave en los ecosistemas acu�ticos al estar dentro de las redes tr�ficas actuando como nexos entre las comunidades terrestres y acu�ticas, ser descomponedores e ingenieros ecosist�micos y contribuir a la bioturbaci�n de los sedimentos. (Ampuero, 2012).
Los moluscos de agua dulce se encuentran en todos los lagos y lagunas del Per�, variando solamente en su clasificaci�n sistem�tica siendo las mismas su h�bitat y su �rea de captura. (Ishiyama y Chavez, 1990)
Este es un alimento muy bueno y saludable, bajo en calor�as, pero alto en prote�nas, yodo hierro y otros minerales. Una raci�n promedio de 90 a 125 g. de carne de almeja es alta en prote�nas �tiles, aunque solo contiene 70 calor�as y tiene la misma cantidad de hierro que una raci�n igual de h�gado de buena calidad. (Desrosier, 1985)
Los moluscos puesto que son animales que se alimentan filtrando el agua, concentran sus bacterias y virus y pueden convertirse en vehiculizadores peligrosos de microorganismos pat�genos ent�ricos. Su peligrosidad es doble porque muchos se consumen crudos o ligeramente cocidos. La frecuente descarga de desechos humanos en agua de estuarios, proximidades de la costa, lagos y r�os y el aumento constante de las poblaciones de las ciudades aumentan la preocupaci�n por estos problemas (lngram, 1980).
Seg�n la Organizaci�n Panamericana de la Salud, 1992, menciona que el Vibrio cholerae es una bacteria causante del c�lera se ha asociado con el consumo de numerosos productos de pesca incluyendo: crust�ceos, moluscos (ostras, almejas, mejillones) y el pescado procesado desecado. Los moluscos bivalvos, que son consumidores filtrantes, pueden estar expuestos y acumular las bacterias y los virus potencialmente pat�genos adem�s de las toxinas naturales y los productos qu�micos contaminantes. Causa gran inquietud el consumo de moluscos bivalvos crudos u otros productos de pesca crudos que pueden estar contaminados con el Vibrio cholerae.�
Los moluscos tambi�n pueden actuar como vectores de par�sitos responsables de enfermedades de car�cter zoon�tico. Por ejemplo, en zonas del litoral de Ecuador se han reportado casos de meningitis eosin�ila (causada por el par�sito Angiostrongylus cantonensis) por ingesti�n de moluscos nativos como Pomacea lineata, e introducidos como P. canaliculata. La presencia reciente de este par�sito en Ecuador y el hallazgo parasitol�gico en hospederos definitivos e intermediarios constituye el primer registro de infecci�n natural de ratas con este par�sito y la descripci�n del primer foco natural en Ecuador y en Suram�rica (Muzzio 2011, Solorzano 2014, Correoso et al. 2015).
En la actualidad se cuenta con pocos estudios que identifiquen a los pat�genos bacterianos causantes de cuadros patog�nicos en larvas y juveniles de moluscos en cultivo, pero cuando estos se han identificado, por lo general se ha comprobado que producen niveles altos de mortalidades en condiciones controladas. La mayor�a de los estudios que identifican a pat�genos de cultivos de moluscos, caracterizan su actividad patog�nica se relacionan con mortalidades en cultivos larvales del osti�n. (De La Fuente et al, 2015)
Es necesario realizar estudios para determinar si Anodontites trapesialis es portador de alg�n pat�geno que pueda provocar enfermedades en el consumidor final.
Conocer esta informaci�n permitir� desarrollar planes de evaluaci�n sanitaria � preventiva y sentara las bases para una explotaci�n acu�cola a nivel intensivo, ya que en la actualidad no es escasa la producci�n cient�fica productiva de esta especie.
El objetivo principal del presente trabajo es identificar la flora bacteriana del tracto digestivo de Anodontites trapesiales mediante el m�todo de tinci�n Gram.
MATERIALES Y METODOS
El presente trabajo se realiz� en las instalaciones del Laboratorio de Biolog�a de la Universidad Nacional Aut�noma de Alto Amazonas en la ciudad de Yurimaguas
Diez ejemplares adultos de Anodontites trapesialis fueron obtenidos de un mercado de abastos local (el vado), ello era indicador de que tales ejemplares eran destinados al consumo humano directo.
Los ejemplares fueron trasladados inmediatamente despu�s de la obtenci�n en cajas isot�rmicas hasta el Laboratorio de Biolog�a de la UNAAA en donde se procedi� a la obtenci�n de la muestra para los an�lisis respectivos
Luego de la separaci�n de las valvas, de cada ejemplar se tomaron 3 muestras (boca, intestino, estomago) haciendo un total de 30 muestras las cuales fueron sometidos a coloracion Gram para la posterior identificaci�n de las bacterias presentes mediante la observaci�n al microscopio a 10x, 40x y posteriormente a 100x con aplicaci�n de aceite de inmersi�n.
Para conseguir resultados reales, todo el procedimiento se realiz� de manera consecutiva, es decir en el mismo d�a para no alterar las condiciones de los tejidos ni de las muestras finales.
Los resultados se fueron almacenados en formatos de registro para la posterior interpretaci�n de los resultados.
RESULTADOS Y DISCUCIONES.
Durante las observaciones solo fue posible identificar Lactobacilos gran positivos en la boca de 2 ejemplares y en el intestino de un ejemplar, adem�s de algunos restos epiteliales y cuerpos amorfos que no se pod�an identificar.
Por los resultados obtenidos se presume que el m�todo de tinci�n Gram tomadas de muestras directas del tejido, no sea la apropiada para este tipo de trabajos de investigaci�n.
En algunos trabajos realizados han detectado bacterias predominantemente Gram negativas en la hemolinfa de ejemplares adultos de A. purpuratus, comport�ndose como microbiota normal (Garc�a-Tello et al. 2002).
Adem�s, se ha caracterizado la poblaci�n de bacterias cultivables presentes en los cultivos larvales y post-larvales de A. purpuratus, encontr�ndose una mayor abundancia de los g�neros Pseudoalteromonas, Bacillus, Marinobacterium, Alteromonas y Vibrio en larvas (Godoy et al. 2011) y del g�nero Vibrio en post-larvas (Avenda�o et al. 2001).
En un estudio realizado para caracterizar el microbiota bacteriano asociada a las primeras etapas del desarrollo de A. purpuratus se observ� un predominio de representantes de los g�neros Pseudomonas, Moraxella y Vibrio durante los procesos de desove realizados en condiciones de laboratorio. Al analizar la actividad de algunas cepas de estos g�neros se pudo detectar la ocurrencia de actividad inhibitoria sobre la capacidad natatoria de larvas de A. purpuratus (Riquelme et al. 1995). En contraposici�n, Llanos et al. (2002) encontraron un porcentaje importante de bacilos Gram positivos.
CONCLUSIONES
El m�todo de tinci�n Gram aplicado a muestras tomadas directamente del tejido no es el adecuado para la identificaci�n a nivel especifico de las bacterias presentes en el tracto digestivo de Anodontites trapesiales.
Debe hacerse cultivos en primer lugar, posteriormente el aislamiento de las sepas para poder identificar a las bacterias y determinar si son nocivas para el ser humano como consumidor directo.
Con los resultados obtenidos a�n no se puede descartar que Anodontites trapesialis no sea portadora de bacterias da�inas. Se debe profundizar en el estudio y experimentar con otros m�todos.
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