AISLAMIENTO Y ANÁLISIS DEL CRECIMIENTO DE
TRICHOPHYTON RUBRUM EN CASO DE
ONICOMICOSIS

ISOLATION AND GROWTH ANALYSIS OF TRICHOPHYTON

RUBRUM IN PATIENT WITH ONYCHOMYCOSIS

Charbell Vargas Rojas

Caja Costarricense del Seguro Social

Ian Cambronero-Ortiz

Caja Costarricense del Seguro Social
pág. 4136
DOI:
https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i3.18046
Aislamiento y análisis del crecimiento de Trichophyton rubrum en caso de
onicomicosis

Charbe
ll Vargas Rojas1
charbel.vargas@gmail.com

https://orcid.org/0009-0001-5756-9519

Caja Costarricense del Seguro Social

Costa Rica

Ian Cambronero
-Ortiz
ico.258@gmail.com

https://orcid.org/
0009-0000-1658-3659
Caja Costarricense del Seguro Social

Costa Rica

RESUMEN

Justificación y Objetivo: La onicomicosis es una de las enfermedades causadas por hongos que se
observa con mayor frecuencia en el laboratorio clínico. Trichophyton rubrum es el hongo más aislado
en pacientes costarricenses que padecen este cuadro, por lo tanto, observar su crecimiento en los medios
es clave para otorgar un diagnóstico certero y rápido. Métodos: Se estudió el caso de un paciente,
conocido con onicomicosis desde hace más de 1 año en la uña del primer dedo del pie derecho, el cual
llega a un laboratorio de servidor privado a realizarse un análisis de rutina para la identificación y el
aislamiento del agente etiológico causante del cuadro. Resultados: En el caso estudiado se observó
micelio hialino al examen directo y el crecimiento de una colonia algodonosa hialina después de 7 días
de incubación. Se logró aislar e identificar a T. rubrum como el agente etiológico en el paciente, especie
en la cual se ha empezado a reportar la emergencia de la resistencia a antifúngicos en los últimos años.

Conclusión: El aislamiento y la identificación del agente causal de onicomicosis en los medios clásicos
permite un diagnóstico oportuno del cuadro para que el personal médico pueda dar el tratamiento
adecuado.

Palabras clave: onicomicosis, dermatofitomicosis, Trichophyton rubrum

1
Autor principal.
Correspondencia:
charbel.vargas@gmail.com
pág. 4137
Isolation and growth analysis of
Trichophyton rubrum in patient with
onychomycosis

ABSTRACT

Background.
Onychomycosis is one of the most frequently observed fungal diseases in the clinical
laboratory.
Trichophyton rubrum is the most frequently isolated fungus in Costa Rican patients with this
condition; therefore, observing its growth in the media is key to providing an accurate and rapid

diagnosis.
Methods. We studied the case of a patient with known onychomycosis of the right big toenail
for over a year. The patient was presented to a private laboratory for routine testing to identify and

isolat
e the etiologic agent causing the condition. Results. In the case studied, hyaline mycelium was
observed upon direct examination and the growth of a hyaline cottony colony after 7 days of incubation.

T. rubrum
was isolated and identified as the etiologic agent in the patient, a species in which the
emergence of antifungal resistance has begun to be reported in
the recent years. Conclusion. Isolation
and identification of the causative agent of onychomycosis in traditional settings allows for timely

diagnosis so medical personnel can provide appropriate treatme
nt.
Keywords: onychomycosis, dermatophytosis, Trichophyton rubrum

Artículo recibido 15 mayo 2025

Aceptado para publicación: 19 junio 2025
pág. 4138
INTRODUCCIÓN

La onicomicosis es la infección fúngica de la uña, donde se afecta principalmente la lámina ungeal. El
cuadro clínico se caracteriza por decoloración, engrosamiento y la onicolisis, que es la separación de la
lámina ungeal del lecho ungeal e inclusive, en pacientes con cuadros crónicos, la piel cercana puede
verse afectada (Gupta et al., 2020; Shah et al., 2025).

La presentación clínica se divide en onicomicosis subungeal distal, es la enfermedad ungueal más
común, en esta la lesión fúngica comienza en el borde distal de la uña, afectando lecho ungueal, la
lámina ungueal y el hiponiquio, la forma subungeal distal lateral es la forma en que la lesión avanza por
el borde la uña hacia el centro y, usualmente empieza después de una tinea pedis, por último, la
onicomicosis proximal se caracteriza por la invasión de los pliegues proximales y por un color
blanquecino en la parte afectada. La onicomicosis ocurre principalmente en las uñas de los dedos del
pie,
siendo la uña del primer dedo del pie la más comúnmente afectada (Welsh, Vera-Cabrera y Welsh,
2010;
Gupta et al., 2020).
Tradicionalmente, se pensaba que los dermatofitos eran los únicos agentes etiológicos, sin embargo,
actualmente se divide en tres grupos a los agentes causantes: hongos dermatofitos, hongos filamentosos
no dermatofitos (HFND, por sus siglas) causantes de onicomicosis y levaduras. Por esta razón, en la
actualidad, se utiliza el término onicomicosis para englobar a las infeccioenes fúngicas en las uñas, sean
causadas por dermatofitos o por HFND (Salas-Campos, Gross-Martínez y Carillo-Dover, 2009; Shah et
al., 2025).

La mayor parte de aislamientos de dermatofitos en casos de onicomicosis son por Trichophyton rubrum
y T. mentagrophytes/interdigitale (60 70 % casos) y por Epidermophyton floccosum, el resto del
porcentaje de aislamiento corresponde a otras especies de menor prevalencia en estos cuadros, como T.
tonsurans que se presenta principalmente en niños. Estas especies se caracterizan por presentar micelio
hialino artrosporado en su forma parasitaria y suelen entrar por el estrato córneo para después invadir
las capas subyacentes, donde las esporas germinan y el micelio empieza a crecer hacia capas más
profundas (Gupta et al., 2020;
Jazdarehee et al., 2022).
Los HFND causantes de onicomicosis pueden ser hialinos como Fusarium sp. y Scopulariopsis sp.,
principales especies involucradas en la producción del cuadro clínico, siendo la primera una de las
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especies de mayor importancia pues se ha reportado casos donde
a partir de una lesión en una uña, un
paciente desarrolló una enfermedad diseminada; también puede ser causada por HFND fuliginosos
como
Acremonium sp. y Neoscytallidium dimidiatum. Por otro lado, las onicomicosis causadas por
levaduras son principalmente por especies del género Candida y suelen presentarse principalmente en
las uñas de los dedos de la mano (Girmenia et al., 1992; Jazdarehee et al., 2022).

En Costa Rica, no se disponen estudios de caso recientes sobre casos de onicomicosis ni sobre cómo es
el crecimiento de sus agentes en los medios de rutina en el laboratorio. Por lo tanto, l
a presente
investigación tiene como objetivo observar y describir el crecimiento in vitro de un aislamiento clínico
costarricense de Trichophyton rubrum proveniente de onicomicosis para actualizar sobre la presentación
clínica en el país.

METODOLOGÍA

Recolección de la muestra. En la presente investigación se trabajó con el aislamiento fúngico
proveniente de una uña infectada de un paciente que acuduió a un laboratorio de servidor privado pues
tenía una lesión subgungeal lateral distal hace más de un año. Se procedió a cortar la uña en pedazos
aproximados de 1 mm y a raspar la zona afectada sin limpiarla previamente con alcohol, para obtener
material que fue recolectado en una caja de petri estéril para hacer el montaje en hidróxido de potasio
(KOH) al 40% para observar estructuras microscópicas fúngicas y para poder obtener material para
cultivar.

Aislamiento. Se cultivó la muestra obtenida en Agar Glucosado de Sabouraud (AGS, por sus siglas) y
en Agar Mycosel® para intentar aislar el hongo patógeno, los cuales fueron sellados e incubados a
temperatura ambiente por 15 días, observando el crecimiento en los agares cada 7 días para intentar
identificar colonias sospechosas.

Identificación. Las colonias sospechosas fueron identificadas microscópicamente utilizando azul de
lactofenol como medio de montaje.
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RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Después de atender al paciente y hacer la anamnesis correcta este indicó que la lesión le empezó hace
más de un año y decidió consultar porque estaba creciendo.
El cuadro fue clasificado como onicomicosis
subungeal lateral distal (Figura 1) dado que la lesión empezaba por el borde libre de la uña y se extendía
hacia el centro, donde generaba onicolisis.

Figura 1. Uña afectada del paciente, mostrando una lesión lateral distal.

Se
procedió a colocar fragmentos de la uña en un portaobjetos con KOH al 40 %, el cual fue calentado
posteriormente a la llama de un mechero para facilitar la observación de estructuras fúngicas. Al
microscopio se observó micelio hialino artrosporado (Figura 2) por lo que otras muestras de uña se
decidieron cultivar en AGS y agar Mycosel®.

Figura 2. Micelio hialino septado artrosporado observado al examen directo con KOH 40 %.

Al cuarto día de incubación, se observó crecimiento bacteriano alrededor de las zonas de inoculación en
el AGS, siendo mal interpretado macroscópicamente como Candida sp. por las características
semejantes macroscópicas que presentaban las colonias en el agar (Figura 3). Sin embargo, a los siete
días de inoculada la uña se procedió a realizar un Gram a las colonias sospechosas, observándose gran
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cantidad de bacterias y no levaduras.

Figura 3. Colonias de aspecto levaduriforme observadas al cuarto día de incubación en AGS.

También se observó una colonia algodonosa sospechosa en el AGS, sin embargo, esta no presentaba
ningún pigmento característico. Se decidió hacer una impronta con cinta adhesiva y al observarla con
azul de lactofenol, fue posible identificar micelio hialino septado en gran cantidad con microaleurias
pedunculadas, estructuras características de Trichophyton rubrum (Figura 4).

Figura 4. Micelio hialino septado con micoraeluriosporas piriformes de T. rubrum al séptimo día de
incubación en AGS a temperatura ambiente.

Los agares se dejaron incubando 7 días más para que las colonias del hongo pudieran madurar más para
hacer una identificación más exacta de la especie. Entonces, a los 14 días de incubación, desde que se
cultivó el fragmento de la uña, se observó una colonia similar a la observada en AGS en una zona de
inoculación del agar Mycosel®, sin embargo, esta era de mayor tamaño (Figura 5), por lo que para
descartar que fuera otro agente etiológico se realizó otra impronta con cinta adhesiva y azul de
lactofenol, observando nuevamente micelio hialino septado con microaleuriosporas (Figura 6), por lo
que la identificación final del agente causal de la onicomicosis fue T. rubrum.
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Figura 5. Colonia algodonosa hialina observada en agar Mycosel® a las dos semanas de incubación a
temperatura ambiente.

Figura 4. Micelio hialino septado con micoraeluriosporas piriformes de T. rubrum a las dos semanas de
incubación en agar Mycosel® a temperatura ambiente.

El KOH es un reactivo de rutina utilizando en los laboratorios de micología médica pues digiere la
queratina de la muestra, lo que facilita la observación de estructuras fúngicas al microscopio, ya que
además
aplana el fragmento ungueal y minimizar la refracción de la luz en los bordes celulares Gupta
et al., 2020; Shah et al., 2025)
. Al usar este agente, fue posible observar el micelio hialino artrosporado
lo cual orientaba a que la lesión era causada por un dermatofito, pues los hongos de este grupo parasitan
con dicha forma, lo que concuerda con lo observado por Tullio et al. (2025) quienes estudiaron lesiones
de uñas y piel de 5 pacientes que padecían una dermatofitomicosis por T. rubrum, sin embargo, en este
estudio se utilizó KOH al 20 % para observar los fragmentos de uña, lo que difiere con esta investigación
puesto que la concentración utilizada en este caso es la recomendada para analizar uñas, lo que
concuerda con Salas-Campos, Gross-Martínez y Carrillo-Dover (2009), quienes analizaron a 3 pacientes
que cursaban con onicomisosis y que para el examen directo usaron KOH al 40 %. Otros investigadores
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como Yue et al. (2015) inclusive usan concentraciones de KOH menores (10 %) para observar los
exámenes directos de uña, sin embargo, en esa investigación solo observaron micelio hialino al directo,
no se osbervaron las artrosporas clásicas.

Por otra parte, los resultados obtenidos en los agares, también lo sustentan la literatura pues, las colonias
típicas de T. rubrum son algodonosas de color blanco al anverso, sin embargo, esto discrepa con los
resultados que obtuvieron Yue et al. (2015) quienes obtuvieron colonias algodonosas al anverso con una
difusión de pigmento rojizo al reverso. También difiere con los resultados de Tullio et al. (2025) pues
las colonias obtenidas en este estudio fueron algodonosas con pigmento rojizo al anverso en el caso de
2 pacientes y con pigmento amarillento-café en el caso de 3 pacientes.

El pigmento producido por T. rubrum es muy variable en los medios de cultivo, por ejemplo, en AGS
la producción del pigmento rojizo toma hasta 4 semanas después de la inoculación inicial y, suele ser
muy leve, lo que puede explicar las diferencias observadas entre la literatura consultada y el presente
estudio pues solo se incubó por 2 semanas. Además, la presencia de triptosa en los medios de cultivo,
inhibe la producción de pigmentos, por lo que podría ser un factor deteterminante en el presente estudio
y, el pH juega un papel importante en la producción o no del pigmento (Blechert et al., 2019).

Por lo tanto, es difícil estandarizar los pigmentos que esta especie pueden producir en los aislamientos
clínicos ya que, como mencionan Blechert et al. (2019) puede verse comprometido por los componentes
del medio de cultivo y del pH final de este. Por lo tanto, las diferencias podrían deberse a que un servidor
use medios preparados a casas comerciales o que sean realizados por el propio laboratorio.

Por otra parte, las estructuras microscópicas observadas, también concuerdan con lo observado con Yue
et al. (2015) quienes observaron micelio hialino septado con microaleuriosporas en forma de pera y
también concuerda con Packeu, Stubbe y Hendrickx (2021) quienes al hacer una descripción del
complejo Trichophyton rubrum enlistan estas estructuras microscópicas como características de la
especie. Vielle (2024) tambié describió a la especie con micelio hialino sepatado con aleurias piriformes,
por lo que se puede observar que las variaciones ocurren principalmente en la morfología macroscópica
con la producción o no de pigmento y su color y que microscópicamente, la morfología es más constante
y con esto es que se hace su identificación.

Para finalizar, el aislamiento e identificación de T. rubrum en una muestra de onicomicosis distal lateral
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también concuerda con lo reportado pues, Starace et al. (2023) comentan que en este tipo, este hongo es
el principal agente etiológico y que es menos común encontrar a T. mentagrophytes/interdigitale o a E.
floccosum como agentes causales. De igual manera, el resultado obtenido es sustentado por Salas-
Campos y Gross-Martínez (2012) quienes encontraron que, en Costa Rica, T. rubrum es el hongo que
más se aísla de uñas de los dedos del pie hasta en un 66,9 % de los casos.

Este porcentaje de aislamientos positivos puede deberse a que es un hongo antropofílico y que además
se ha podido aislar de sitios de uso común por humanos como en alfombras, vestidores y baños, por lo
que su transmisión se da por el contacto con fomites ambientales. Este hongo se mantiene en humanos
y rara vez se transmite a animales, por lo que es posible que el paciente se infectara a través de esporas
que quedaron en el ambiente y no por un animal (Segal y Elad, 2021;
Jazdarehee et al., 2022; Rómulo-
Pérez, Zamora-Rodríguez y Fernández-Torres, 2022
).
CONCLUSIONES

Se concluye que el crecimiento macroscópico de Trichophyton rubrum es afectado por las condiciones
de incubación, principalmente tiempo y por la composición del medio en el que se siembre. Por lo tanto,
obtener resultados comparables entre laboratorios de distintos servidores es difícil ya que los agares
utilizados así como la composición de estos cambia de lugar a lugar, sin embargo, a nivel microscópico
el hongo muestra sus estructuras características al obtener colonias maduras independientemente de la
composición y del tipo de agar utilizado.

REFERENCIAS
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