pág. 9134
POTENCIAL PROBIÓTICO DE BACTERIAS ÁCIDO
LÁCTICAS PRESENTES EN EL MUCÍLAGO DE
CACAO (THEOBROMA CACAO L.)
PROBIOTIC POTENTIAL OF LACTIC ACID BACTERIA
PRESENT IN COCOA MUCILAGE (THEOBROMA CACAO
L.).
Wilson Adrián Alcívar Muñoz
Universidad técnica estatal de Quevedo
Erika Jamilex Vanoni Fernandez
Universidad técnica estatal de Quevedo
Nancy Alexandra Medrano Ortiz
Universidad UTE
Adriana Rosaura González Alcivar
Universidade Do Algarve
pág. 9135
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i4.19472
Potencial probiótico de bacterias ácido lácticas presentes en el mucílago de
cacao (Theobroma cacao L.)
Wilson Adrián Alcívar Muñoz1
walcivarm4@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0009-0003-0487-379X
Universidad técnica estatal de Quevedo
Erika Jamilex Vanoni Fernandez
Erika.vanoni2014@hotmail.com
https://orcid.org/0009-0002-2375-2160
Universidad técnica estatal de Quevedo
Nancy Alexandra Medrano Ortiz
Nancy-medrano@outlook.es
https://orcid.org/0009-0001-5257-2006
Universidad UTE
Adriana Rosaura González Alcivar
adrianagonzalezalcivar@gmail.com
https://orcid.org/0009-0005-7887-719X
Universidade Do Algarve
RESUMEN
El mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) constituye un subproducto agrícola de alto potencial
biotecnológico, al albergar una microbiota diversa donde predominan bacterias ácido lácticas (BAL)
con propiedades funcionales de interés. El objetivo de la presente investigación fue identificar las BAL
presentes en el mucílago de cacao y evaluar su capacidad probiótica, con el fin de proponer alternativas
sostenibles para la valorización de este recurso. Para ello, se recolectaron muestras de mucílago en
plantaciones locales y se realizaron aislamientos en medio MRS Agar bajo condiciones de
microaerofilia. Los cultivos obtenidos fueron caracterizados mediante pruebas morfoquímicas y
bioquímicas (Gram, catalasa, oxidasa y ureasa), antibiograma y secuenciación del gen ARNr 16S. Los
resultados evidenciaron que las cepas aisladas correspondieron a bacilos Gram positivos, catalasa
positivas y ureasa positivas, confirmando su pertenencia al grupo de BAL. El antibiograma mostró
sensibilidad a ampicilina y tetraciclina, resistencia parcial a gentamicina y sensibilidad intermedia frente
a cloranfenicol y eritromicina. La identificación molecular reveló una similitud superior al 99 % con
Lactobacillus acidophilus. Asimismo, las pruebas de tolerancia a bilis, acidez y co-agregación con
patógenos confirmaron su potencial probiótico. Se concluye que el mucílago de cacao constituye una
fuente valiosa de BAL con aplicación en la industria alimentaria, aportando a la sostenibilidad de la
cadena cacaotera ecuatoriana.
Palabras clave: Probióticos, Theobroma cacao, bacterias, mucílago, biotecnología
1 Autor principal
Correspondencia: walcivarm4@uteq.edu.ec
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i4.19472
Potencial probiótico de bacterias ácido lácticas presentes en el mucílago de
cacao (Theobroma cacao L.)
Wilson Adrián Alcívar Muñoz1
walcivarm4@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0009-0003-0487-379X
Universidad técnica estatal de Quevedo
Erika Jamilex Vanoni Fernandez
Erika.vanoni2014@hotmail.com
https://orcid.org/0009-0002-2375-2160
Universidad técnica estatal de Quevedo
Nancy Alexandra Medrano Ortiz
Nancy-medrano@outlook.es
https://orcid.org/0009-0001-5257-2006
Universidad UTE
Adriana Rosaura González Alcivar
adrianagonzalezalcivar@gmail.com
https://orcid.org/0009-0005-7887-719X
Universidade Do Algarve
RESUMEN
El mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) constituye un subproducto agrícola de alto potencial
biotecnológico, al albergar una microbiota diversa donde predominan bacterias ácido lácticas (BAL)
con propiedades funcionales de interés. El objetivo de la presente investigación fue identificar las BAL
presentes en el mucílago de cacao y evaluar su capacidad probiótica, con el fin de proponer alternativas
sostenibles para la valorización de este recurso. Para ello, se recolectaron muestras de mucílago en
plantaciones locales y se realizaron aislamientos en medio MRS Agar bajo condiciones de
microaerofilia. Los cultivos obtenidos fueron caracterizados mediante pruebas morfoquímicas y
bioquímicas (Gram, catalasa, oxidasa y ureasa), antibiograma y secuenciación del gen ARNr 16S. Los
resultados evidenciaron que las cepas aisladas correspondieron a bacilos Gram positivos, catalasa
positivas y ureasa positivas, confirmando su pertenencia al grupo de BAL. El antibiograma mostró
sensibilidad a ampicilina y tetraciclina, resistencia parcial a gentamicina y sensibilidad intermedia frente
a cloranfenicol y eritromicina. La identificación molecular reveló una similitud superior al 99 % con
Lactobacillus acidophilus. Asimismo, las pruebas de tolerancia a bilis, acidez y co-agregación con
patógenos confirmaron su potencial probiótico. Se concluye que el mucílago de cacao constituye una
fuente valiosa de BAL con aplicación en la industria alimentaria, aportando a la sostenibilidad de la
cadena cacaotera ecuatoriana.
Palabras clave: Probióticos, Theobroma cacao, bacterias, mucílago, biotecnología
1 Autor principal
Correspondencia: walcivarm4@uteq.edu.ec
pág. 9136
Probiotic potential of lactic acid bacteria present in cocoa mucilage
(Theobroma cacao L.).
ABSTRACT
Cocoa mucilage (Theobroma cacao L.) is an agricultural byproduct with high biotechnological potential,
harboring a diverse microbiota dominated by lactic acid bacteria (LAB) with interesting functional
properties. The objective of this research was to identify the LAB present in cocoa mucilage and evaluate
their probiotic capacity, in order to propose sustainable alternatives for the valorization of this resource.
To this end, mucilage samples were collected from local plantations and isolated on MRS agar under
microaerophilic conditions. The cultures obtained were characterized using morphochemical and
biochemical tests (Gram, catalase, oxidase, and urease), antibiograms, and 16S rRNA gene sequencing.
The results showed that the isolated strains corresponded to Gram-positive, catalase-positive, and
urease-positive bacilli, confirming their belonging to the LAB group. The antibiogram showed
sensitivity to ampicillin and tetracycline, partial resistance to gentamicin, and intermediate sensitivity
to chloramphenicol and erythromycin. Molecular identification revealed greater than 99% similarity
with Lactobacillus acidophilus. Furthermore, bile tolerance, acidity, and co-aggregation with pathogens
tests confirmed its probiotic potential. It is concluded that cocoa mucilage constitutes a valuable source
of LAB with applications in the food industry, contributing to the sustainability of the Ecuadorian cocoa
chain.
Keywords: Probiotics, Theobroma cacao, bacteria, mucilage, biotechnology
Artículo recibido 20 julio 2025
Aceptado para publicación: 20 agosto 2025
Probiotic potential of lactic acid bacteria present in cocoa mucilage
(Theobroma cacao L.).
ABSTRACT
Cocoa mucilage (Theobroma cacao L.) is an agricultural byproduct with high biotechnological potential,
harboring a diverse microbiota dominated by lactic acid bacteria (LAB) with interesting functional
properties. The objective of this research was to identify the LAB present in cocoa mucilage and evaluate
their probiotic capacity, in order to propose sustainable alternatives for the valorization of this resource.
To this end, mucilage samples were collected from local plantations and isolated on MRS agar under
microaerophilic conditions. The cultures obtained were characterized using morphochemical and
biochemical tests (Gram, catalase, oxidase, and urease), antibiograms, and 16S rRNA gene sequencing.
The results showed that the isolated strains corresponded to Gram-positive, catalase-positive, and
urease-positive bacilli, confirming their belonging to the LAB group. The antibiogram showed
sensitivity to ampicillin and tetracycline, partial resistance to gentamicin, and intermediate sensitivity
to chloramphenicol and erythromycin. Molecular identification revealed greater than 99% similarity
with Lactobacillus acidophilus. Furthermore, bile tolerance, acidity, and co-aggregation with pathogens
tests confirmed its probiotic potential. It is concluded that cocoa mucilage constitutes a valuable source
of LAB with applications in the food industry, contributing to the sustainability of the Ecuadorian cocoa
chain.
Keywords: Probiotics, Theobroma cacao, bacteria, mucilage, biotechnology
Artículo recibido 20 julio 2025
Aceptado para publicación: 20 agosto 2025
pág. 9137
INTRODUCCIÓN
El cacao (Theobroma cacao L.) constituye uno de los cultivos más relevantes a nivel mundial debido a
su valor económico, social y cultural. La producción global supera los cinco millones de toneladas
anuales, siendo materia prima esencial para la industria chocolatera (Bautista, 2020). En Ecuador, este
cultivo ocupa un lugar estratégico al posicionarse como exportador líder de cacao fino de aroma,
reconocido internacionalmente por su calidad y aporte al desarrollo agroproductivo (García et al., 2021).
No obstante, durante el procesamiento del cacao se generan subproductos como el mucílago, una
sustancia viscosa y rica en azúcares que recubre las semillas. Se estima que por cada tonelada de cacao
se desperdician más de 70 litros de mucílago, lo cual representa un problema ambiental y económico si
no se aprovecha adecuadamente (Cortez & Oleas, 2023; Fernández et al., 2022). En contraposición,
diversos estudios demuestran que este subproducto puede convertirse en un recurso biotecnológico con
aplicaciones en la industria alimentaria, agrícola y farmacéutica (Dybka et al., 2021; Castro, 2023).
En el contexto microbiológico, el mucílago de cacao alberga una amplia diversidad de bacterias ácido
lácticas (BAL), microorganismos Gram positivos que producen ácido láctico como principal metabolito
de fermentación y que poseen propiedades probióticas de alto valor (Flores-Maciel et al., 2024). Estas
bacterias no solo intervienen en la fermentación del cacao, mejorando el perfil sensorial del chocolate
(De Vuyst & Leroy, 2020), sino que además han mostrado potencial para la conservación de alimentos,
la inhibición de patógenos y la modulación del microbiota intestinal (Corrales y Palacios, 2020;
Hernández et al., 2021).
El estado del arte confirma este potencial. Aka et al. (2020) caracterizaron BAL en bebidas tradicionales
africanas, proponiendo su uso como cultivos iniciadores seguros. En Ecuador, García et al. (2021)
exploraron el empleo de mucílago de cacao como inoculante en quesos, mientras que investigaciones
como las de Alvarado Rivas et al. (2007) y Anillo y María (2023) evidencian la capacidad
bioconservante de las BAL en distintos alimentos. Estos hallazgos sugieren que el mucílago de cacao
ecuatoriano puede convertirse en una fuente alternativa de probióticos naturales, alineada con tendencias
globales hacia la sostenibilidad y la seguridad alimentaria.
Bajo este contexto, la presente investigación tiene como objetivo general: identificar las bacterias ácido
lácticas presentes en el mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) a las 48 horas de fermentación y
INTRODUCCIÓN
El cacao (Theobroma cacao L.) constituye uno de los cultivos más relevantes a nivel mundial debido a
su valor económico, social y cultural. La producción global supera los cinco millones de toneladas
anuales, siendo materia prima esencial para la industria chocolatera (Bautista, 2020). En Ecuador, este
cultivo ocupa un lugar estratégico al posicionarse como exportador líder de cacao fino de aroma,
reconocido internacionalmente por su calidad y aporte al desarrollo agroproductivo (García et al., 2021).
No obstante, durante el procesamiento del cacao se generan subproductos como el mucílago, una
sustancia viscosa y rica en azúcares que recubre las semillas. Se estima que por cada tonelada de cacao
se desperdician más de 70 litros de mucílago, lo cual representa un problema ambiental y económico si
no se aprovecha adecuadamente (Cortez & Oleas, 2023; Fernández et al., 2022). En contraposición,
diversos estudios demuestran que este subproducto puede convertirse en un recurso biotecnológico con
aplicaciones en la industria alimentaria, agrícola y farmacéutica (Dybka et al., 2021; Castro, 2023).
En el contexto microbiológico, el mucílago de cacao alberga una amplia diversidad de bacterias ácido
lácticas (BAL), microorganismos Gram positivos que producen ácido láctico como principal metabolito
de fermentación y que poseen propiedades probióticas de alto valor (Flores-Maciel et al., 2024). Estas
bacterias no solo intervienen en la fermentación del cacao, mejorando el perfil sensorial del chocolate
(De Vuyst & Leroy, 2020), sino que además han mostrado potencial para la conservación de alimentos,
la inhibición de patógenos y la modulación del microbiota intestinal (Corrales y Palacios, 2020;
Hernández et al., 2021).
El estado del arte confirma este potencial. Aka et al. (2020) caracterizaron BAL en bebidas tradicionales
africanas, proponiendo su uso como cultivos iniciadores seguros. En Ecuador, García et al. (2021)
exploraron el empleo de mucílago de cacao como inoculante en quesos, mientras que investigaciones
como las de Alvarado Rivas et al. (2007) y Anillo y María (2023) evidencian la capacidad
bioconservante de las BAL en distintos alimentos. Estos hallazgos sugieren que el mucílago de cacao
ecuatoriano puede convertirse en una fuente alternativa de probióticos naturales, alineada con tendencias
globales hacia la sostenibilidad y la seguridad alimentaria.
Bajo este contexto, la presente investigación tiene como objetivo general: identificar las bacterias ácido
lácticas presentes en el mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) a las 48 horas de fermentación y
pág. 9138
determinar su capacidad probiótica. De manera específica, se planteó: (i) aislar las cepas de BAL del
mucílago de cacao, (ii) caracterizar bioquímica y morfológicamente los aislamientos, y (iii) evaluar in
vitro su potencial probiótico. Los resultados buscan aportar conocimiento científico y proponer
estrategias para el aprovechamiento sostenible de un subproducto con alto valor agregado en el sector
agroalimentario ecuatoriano.
METODOLOGÍA
Diseño de investigación
La investigación se desarrolló bajo un diseño experimental de laboratorio con enfoque cuantitativo y
descriptivo, orientado al aislamiento, identificación y evaluación del potencial probiótico de bacterias
ácido lácticas (BAL) presentes en el mucílago de cacao (Theobroma cacao L.). El estudio se realizó en
los laboratorios de microbiología de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, durante el año 2023,
siguiendo protocolos de bioseguridad y control de calidad en cada etapa del proceso.
Obtención de muestras
Las mazorcas de cacao fueron recolectadas en plantaciones de la provincia de Los Rios, zona reconocida
por la producción de cacao fino de aroma. Se seleccionaron frutos maduros en buen estado fitosanitario,
libres de daños mecánicos y sin signos de contaminación. El mucílago fue extraído en condiciones
estériles, depositado en frascos de vidrio previamente esterilizados y transportado en cajas refrigeradas
a 4 °C hasta el laboratorio, con el fin de preservar la viabilidad de los microorganismos nativos. Se
siguieron los protocolos de De Vuyst y Leroy, (2020); Castro, (2023) para controlar el tiempo
transcurrido entre la cosecha y el procesamiento no superó las 24 horas, considerando que la
composición microbiana del mucílago puede alterarse rápidamente bajo condiciones ambientales.
Aislamiento e identificación de bacterias ácido lácticas
Para el aislamiento de BAL se sembraron alícuotas de mucílago en medio MRS Agar (de Man, Rogosa
y Sharpe), suplementado con cicloheximida para inhibir el desarrollo de hongos y levaduras. Las placas
fueron incubadas a 37 °C durante 48 horas bajo condiciones de microaerofilia. Se siguieron los
protocolos de Aka et al., (2020) en relación a las colonias con morfología típica, misma que fueron
repicadas en varias ocasiones hasta obtener cultivos puros, que se conservaron en caldo MRS con
glicerol al 20 % a –20 °C
determinar su capacidad probiótica. De manera específica, se planteó: (i) aislar las cepas de BAL del
mucílago de cacao, (ii) caracterizar bioquímica y morfológicamente los aislamientos, y (iii) evaluar in
vitro su potencial probiótico. Los resultados buscan aportar conocimiento científico y proponer
estrategias para el aprovechamiento sostenible de un subproducto con alto valor agregado en el sector
agroalimentario ecuatoriano.
METODOLOGÍA
Diseño de investigación
La investigación se desarrolló bajo un diseño experimental de laboratorio con enfoque cuantitativo y
descriptivo, orientado al aislamiento, identificación y evaluación del potencial probiótico de bacterias
ácido lácticas (BAL) presentes en el mucílago de cacao (Theobroma cacao L.). El estudio se realizó en
los laboratorios de microbiología de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, durante el año 2023,
siguiendo protocolos de bioseguridad y control de calidad en cada etapa del proceso.
Obtención de muestras
Las mazorcas de cacao fueron recolectadas en plantaciones de la provincia de Los Rios, zona reconocida
por la producción de cacao fino de aroma. Se seleccionaron frutos maduros en buen estado fitosanitario,
libres de daños mecánicos y sin signos de contaminación. El mucílago fue extraído en condiciones
estériles, depositado en frascos de vidrio previamente esterilizados y transportado en cajas refrigeradas
a 4 °C hasta el laboratorio, con el fin de preservar la viabilidad de los microorganismos nativos. Se
siguieron los protocolos de De Vuyst y Leroy, (2020); Castro, (2023) para controlar el tiempo
transcurrido entre la cosecha y el procesamiento no superó las 24 horas, considerando que la
composición microbiana del mucílago puede alterarse rápidamente bajo condiciones ambientales.
Aislamiento e identificación de bacterias ácido lácticas
Para el aislamiento de BAL se sembraron alícuotas de mucílago en medio MRS Agar (de Man, Rogosa
y Sharpe), suplementado con cicloheximida para inhibir el desarrollo de hongos y levaduras. Las placas
fueron incubadas a 37 °C durante 48 horas bajo condiciones de microaerofilia. Se siguieron los
protocolos de Aka et al., (2020) en relación a las colonias con morfología típica, misma que fueron
repicadas en varias ocasiones hasta obtener cultivos puros, que se conservaron en caldo MRS con
glicerol al 20 % a –20 °C
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La identificación fenotípica se realizó mediante tinción de Gram y prueba de catalasa, confirmando la
condición Gram positiva y catalasa negativa de las cepas (Bado, 2022; Bou et al., 2011). Se observaron
además sus características morfológicas bajo microscopía óptica, mientras que la capacidad de
fermentación de carbohidratos se evaluó utilizando el sistema API 50 CHL (bioMérieux®).
Adicionalmente, se ensayó la tolerancia al crecimiento bajo diferentes concentraciones de NaCl,
variaciones de pH y temperaturas de incubación, con el fin de establecer el rango de adaptación
fisiológica de los aislamientos.
Evaluación de la capacidad probiótica
El potencial probiótico de las cepas se evaluó mediante ensayos in vitro. En primer lugar, se analizó la
resistencia a condiciones gastrointestinales simuladas, exponiendo las bacterias a jugo gástrico artificial
ajustado a pH 2,0 con pepsina durante dos horas, seguido de incubación en bilis oxgall al 0,3 % por
cuatro horas a 37 °C, determinándose la viabilidad mediante recuento en placas expresado en log
UFC/mL (Corrales Benedetti & Arias Palacios, 2020). Posteriormente, se midió la autoagregación de
las bacterias a través de variaciones en la absorbancia de suspensiones celulares a 600 nm, y la co-
agregación al mezclarlas con cultivos de Escherichia coli, Salmonella enterica y Staphylococcus aureus,
observando la reducción de turbidez en las mezclas.
Análisis de datos
Los resultados experimentales fueron procesados mediante estadística descriptiva y expresados como
media ± desviación estándar. Se aplicaron pruebas de normalidad de Kolmogorov-Smirnov y análisis
de varianza (ANOVA) con un nivel de significancia de p < 0,05, utilizando el software SPSS v.25. La
interpretación de los hallazgos se realizó en comparación con investigaciones previas que reportan
parámetros de referencia para BAL con potencial probiótico.
Resultados
Caracterización morfoquímica de los aislamientos
Los aislamientos bacterianos obtenidos del mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) fueron sometidos
a pruebas morfológicas y bioquímicas básicas, incluyendo tinción de Gram, catalasa, oxidasa y ureasa.
La Tabla 1 resume los resultados obtenidos para las cepas analizadas, donde se observa que todas
corresponden a bacilos Gram positivos y presentaron reacción positiva en la prueba de catalasa
La identificación fenotípica se realizó mediante tinción de Gram y prueba de catalasa, confirmando la
condición Gram positiva y catalasa negativa de las cepas (Bado, 2022; Bou et al., 2011). Se observaron
además sus características morfológicas bajo microscopía óptica, mientras que la capacidad de
fermentación de carbohidratos se evaluó utilizando el sistema API 50 CHL (bioMérieux®).
Adicionalmente, se ensayó la tolerancia al crecimiento bajo diferentes concentraciones de NaCl,
variaciones de pH y temperaturas de incubación, con el fin de establecer el rango de adaptación
fisiológica de los aislamientos.
Evaluación de la capacidad probiótica
El potencial probiótico de las cepas se evaluó mediante ensayos in vitro. En primer lugar, se analizó la
resistencia a condiciones gastrointestinales simuladas, exponiendo las bacterias a jugo gástrico artificial
ajustado a pH 2,0 con pepsina durante dos horas, seguido de incubación en bilis oxgall al 0,3 % por
cuatro horas a 37 °C, determinándose la viabilidad mediante recuento en placas expresado en log
UFC/mL (Corrales Benedetti & Arias Palacios, 2020). Posteriormente, se midió la autoagregación de
las bacterias a través de variaciones en la absorbancia de suspensiones celulares a 600 nm, y la co-
agregación al mezclarlas con cultivos de Escherichia coli, Salmonella enterica y Staphylococcus aureus,
observando la reducción de turbidez en las mezclas.
Análisis de datos
Los resultados experimentales fueron procesados mediante estadística descriptiva y expresados como
media ± desviación estándar. Se aplicaron pruebas de normalidad de Kolmogorov-Smirnov y análisis
de varianza (ANOVA) con un nivel de significancia de p < 0,05, utilizando el software SPSS v.25. La
interpretación de los hallazgos se realizó en comparación con investigaciones previas que reportan
parámetros de referencia para BAL con potencial probiótico.
Resultados
Caracterización morfoquímica de los aislamientos
Los aislamientos bacterianos obtenidos del mucílago de cacao (Theobroma cacao L.) fueron sometidos
a pruebas morfológicas y bioquímicas básicas, incluyendo tinción de Gram, catalasa, oxidasa y ureasa.
La Tabla 1 resume los resultados obtenidos para las cepas analizadas, donde se observa que todas
corresponden a bacilos Gram positivos y presentaron reacción positiva en la prueba de catalasa
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Tabla 1. Caracterización morfoquímica de bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de cacao.
Cepa Gram Catalasa (CAT) Oxidasa (OXI) Ureasa (URE) Observación microscópica
BACCN + + – + Bacilos cortos
BAN + + – + Bacilos cortos
Nota. Datos obtenidos a partir de pruebas bioquímicas realizadas en laboratorio. “+” indica positividad de la reacción; “–”
ausencia de actividad. Fuente: Vanoni (2024).
Estos resultados se complementan con la Figura 1, donde se evidencian las reacciones bioquímicas de
las cepas aisladas, incluyendo la prueba de ureasa (A), catalasa (B), tinción de Gram (C) y proteasa (D),
confirmando así la identificación preliminar de las bacterias ácido lácticas presentes en el mucílago de
cacao.
Figura 1. Caracterización bioquímica de bacterias acido lácticas. A. Ureasa, B. Catalasa, C. Tinción
Gram, D. Proteasa
Análisis
La caracterización inicial reveló que las cepas aisladas corresponden a bacilos Gram positivos con
actividad catalasa positiva, lo que indica la presencia de enzimas capaces de descomponer el peróxido
de hidrógeno. Estos resultados concuerdan con lo descrito por Bou et al. (2011), quienes señalan que las
BAL pueden presentar variaciones en sus reacciones bioquímicas dependiendo del sustrato de
aislamiento. La positividad en la ureasa sugiere además una capacidad adaptativa en medios ricos en
Tabla 1. Caracterización morfoquímica de bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de cacao.
Cepa Gram Catalasa (CAT) Oxidasa (OXI) Ureasa (URE) Observación microscópica
BACCN + + – + Bacilos cortos
BAN + + – + Bacilos cortos
Nota. Datos obtenidos a partir de pruebas bioquímicas realizadas en laboratorio. “+” indica positividad de la reacción; “–”
ausencia de actividad. Fuente: Vanoni (2024).
Estos resultados se complementan con la Figura 1, donde se evidencian las reacciones bioquímicas de
las cepas aisladas, incluyendo la prueba de ureasa (A), catalasa (B), tinción de Gram (C) y proteasa (D),
confirmando así la identificación preliminar de las bacterias ácido lácticas presentes en el mucílago de
cacao.
Figura 1. Caracterización bioquímica de bacterias acido lácticas. A. Ureasa, B. Catalasa, C. Tinción
Gram, D. Proteasa
Análisis
La caracterización inicial reveló que las cepas aisladas corresponden a bacilos Gram positivos con
actividad catalasa positiva, lo que indica la presencia de enzimas capaces de descomponer el peróxido
de hidrógeno. Estos resultados concuerdan con lo descrito por Bou et al. (2011), quienes señalan que las
BAL pueden presentar variaciones en sus reacciones bioquímicas dependiendo del sustrato de
aislamiento. La positividad en la ureasa sugiere además una capacidad adaptativa en medios ricos en
pág. 9141
compuestos nitrogenados, lo que representa una ventaja en el contexto del mucílago de cacao, dado su
alto contenido de azúcares y nutrientes.
La confirmación mediante tinción de Gram y catalasa coincide con lo reportado por Bado (2022), quien
destaca que estas pruebas son esenciales en la identificación preliminar de BAL. La consistencia entre
los resultados de la Tabla 1 y la evidencia fotográfica de la Figura 1 refuerza la validez de los hallazgos,
consolidando la hipótesis de que el mucílago de cacao constituye un nicho favorable para el desarrollo
de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico.
Prueba de inhibición bacteriológica por antibiograma
Las cepas aisladas del mucílago de cacao fueron evaluadas frente a diferentes antibióticos comerciales
con el fin de determinar su perfil de resistencia y sensibilidad. La Tabla 2 muestra los halos de inhibición
registrados para cada antibiótico, evidenciando variabilidad en la respuesta de las bacterias ácido lácticas
(BAL).
Tabla 2 Antibiograma químico de las bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de cacao.
Antibiótico
Cepa BACCN
(mm)
Cepa BAN (mm) Interpretación general
Ampicilina (10 μg) 22 20 Sensible
Cloranfenicol (30 μg) 18 16 Sensible intermedia
Tetraciclina (30 μg) 24 21 Sensible
Gentamicina (10 μg) 15 13 Resistencia parcial
Eritromicina (15 μg) 19 17 Sensible intermedia
Nota. Los valores corresponden a los diámetros de los halos de inhibición (mm) medidos en agar Mueller-Hinton, a las 24 h de
incubación. Interpretación basada en criterios CLSI. Fuente: Vanoni (2024).
La Figura 2 complementa estos resultados, mostrando de manera visual los halos de inhibición alrededor
de los discos impregnados con antibióticos, donde se observa con claridad la actividad diferencial frente
a ampicilina, tetraciclina y gentamicina.
compuestos nitrogenados, lo que representa una ventaja en el contexto del mucílago de cacao, dado su
alto contenido de azúcares y nutrientes.
La confirmación mediante tinción de Gram y catalasa coincide con lo reportado por Bado (2022), quien
destaca que estas pruebas son esenciales en la identificación preliminar de BAL. La consistencia entre
los resultados de la Tabla 1 y la evidencia fotográfica de la Figura 1 refuerza la validez de los hallazgos,
consolidando la hipótesis de que el mucílago de cacao constituye un nicho favorable para el desarrollo
de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico.
Prueba de inhibición bacteriológica por antibiograma
Las cepas aisladas del mucílago de cacao fueron evaluadas frente a diferentes antibióticos comerciales
con el fin de determinar su perfil de resistencia y sensibilidad. La Tabla 2 muestra los halos de inhibición
registrados para cada antibiótico, evidenciando variabilidad en la respuesta de las bacterias ácido lácticas
(BAL).
Tabla 2 Antibiograma químico de las bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de cacao.
Antibiótico
Cepa BACCN
(mm)
Cepa BAN (mm) Interpretación general
Ampicilina (10 μg) 22 20 Sensible
Cloranfenicol (30 μg) 18 16 Sensible intermedia
Tetraciclina (30 μg) 24 21 Sensible
Gentamicina (10 μg) 15 13 Resistencia parcial
Eritromicina (15 μg) 19 17 Sensible intermedia
Nota. Los valores corresponden a los diámetros de los halos de inhibición (mm) medidos en agar Mueller-Hinton, a las 24 h de
incubación. Interpretación basada en criterios CLSI. Fuente: Vanoni (2024).
La Figura 2 complementa estos resultados, mostrando de manera visual los halos de inhibición alrededor
de los discos impregnados con antibióticos, donde se observa con claridad la actividad diferencial frente
a ampicilina, tetraciclina y gentamicina.
pág. 9142
Figura 2. Inhibición de crecimiento de la colonia de bacterias ácido lácticas en diferentes antibióticos
de amplio espectro. BACCN-1 (Variedad CCN-51), BAN-A (Variedad Nacional).
Análisis
Los resultados obtenidos en la prueba de antibiograma indican que las bacterias ácido lácticas aisladas
del mucílago de cacao muestran una alta sensibilidad frente a antibióticos de uso común como la
ampicilina y la tetraciclina, lo que refleja su naturaleza inocua y la ausencia de resistencia intrínseca a
estos fármacos. Sin embargo, la menor inhibición registrada frente a gentamicina sugiere la existencia
de mecanismos de tolerancia parcial, aspecto que debe considerarse en términos de seguridad
alimentaria y aplicaciones probióticas.
La sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y eritromicina concuerda con estudios similares en
bacterias ácido lácticas aisladas de productos fermentados tradicionales, donde se ha reportado que estos
microorganismos presentan variabilidad en sus perfiles de resistencia según el origen del aislamiento
(Aka et al., 2020). Esto es relevante, ya que uno de los criterios de selección de probióticos seguros es
la ausencia de resistencia adquirida a antibióticos de importancia clínica, lo cual se cumple en este caso.
Identificación molecular y capacidad probiótica
Tras la caracterización bioquímica y los ensayos de susceptibilidad a antibióticos, se seleccionaron
cuatro cepas que presentaron el mejor desempeño para su análisis molecular. La Tabla 3 presenta los
resultados obtenidos a partir de la secuenciación del gen ARNr 16S, donde se observa una identidad
Figura 2. Inhibición de crecimiento de la colonia de bacterias ácido lácticas en diferentes antibióticos
de amplio espectro. BACCN-1 (Variedad CCN-51), BAN-A (Variedad Nacional).
Análisis
Los resultados obtenidos en la prueba de antibiograma indican que las bacterias ácido lácticas aisladas
del mucílago de cacao muestran una alta sensibilidad frente a antibióticos de uso común como la
ampicilina y la tetraciclina, lo que refleja su naturaleza inocua y la ausencia de resistencia intrínseca a
estos fármacos. Sin embargo, la menor inhibición registrada frente a gentamicina sugiere la existencia
de mecanismos de tolerancia parcial, aspecto que debe considerarse en términos de seguridad
alimentaria y aplicaciones probióticas.
La sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y eritromicina concuerda con estudios similares en
bacterias ácido lácticas aisladas de productos fermentados tradicionales, donde se ha reportado que estos
microorganismos presentan variabilidad en sus perfiles de resistencia según el origen del aislamiento
(Aka et al., 2020). Esto es relevante, ya que uno de los criterios de selección de probióticos seguros es
la ausencia de resistencia adquirida a antibióticos de importancia clínica, lo cual se cumple en este caso.
Identificación molecular y capacidad probiótica
Tras la caracterización bioquímica y los ensayos de susceptibilidad a antibióticos, se seleccionaron
cuatro cepas que presentaron el mejor desempeño para su análisis molecular. La Tabla 3 presenta los
resultados obtenidos a partir de la secuenciación del gen ARNr 16S, donde se observa una identidad
pág. 9143
entre el 99 y 100 % con Lactobacillus acidophilus, confirmando que las cepas aisladas corresponden a
este género de relevancia probiótica.
Tabla 3 Identificación molecular del gen ARNr 16S de bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de
cacao.
Cepa Identidad
(%)
Cobertura
(%)
Accession number (NCBI/GenBank)
BACCN-3 99,25 100 NR_117812.1
BACCN-4 99,18 99 MT515967.1
BAN-3 99,24 99 MT464347.1
BAN-4 99,18 99 MT545142.1
Nota. Resultados comparados con la base de datos GenBank (NCBI). Fuente: Vanoni (2024).
En cuanto a la capacidad probiótica, la Figura 2 muestra la cinética de crecimiento de ocho cepas en
condiciones de acidez. Los resultados evidencian que las cepas BACCN-3, BACCN-4, BAN-3 y BAN-
4 presentaron un crecimiento estable incluso en valores bajos de pH, lo que demuestra su capacidad de
tolerar ambientes hostiles similares a los del tracto gastrointestinal. Asimismo, las pruebas
complementarias de tolerancia a bilis y autoagregación indicaron que las cepas seleccionadas poseen
propiedades que refuerzan su viabilidad como probióticos
Análisis
La identificación molecular mediante la secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas más
destacadas corresponden a Lactobacillus acidophilus, especie ampliamente documentada en la literatura
científica por sus beneficios en la salud intestinal y su capacidad de inhibir patógenos entéricos
(Hernández et al., 2021). La alta identidad genética (≥ 99 %) respalda la fiabilidad del análisis y permite
clasificar los aislamientos dentro de un grupo con historial seguro de uso en alimentos.
La evaluación de la cinética de crecimiento bajo condiciones ácidas evidenció que las cepas mantienen
su viabilidad en entornos similares al jugo gástrico, lo que representa un criterio esencial en la selección
de probióticos de uso humano (Corrales Benedetti & Arias Palacios, 2020). De igual forma, su tolerancia
a bilis y su capacidad de autoagregación y co-agregación con bacterias patógenas sugieren un alto
potencial para competir y establecerse en el intestino.
entre el 99 y 100 % con Lactobacillus acidophilus, confirmando que las cepas aisladas corresponden a
este género de relevancia probiótica.
Tabla 3 Identificación molecular del gen ARNr 16S de bacterias ácido lácticas aisladas del mucílago de
cacao.
Cepa Identidad
(%)
Cobertura
(%)
Accession number (NCBI/GenBank)
BACCN-3 99,25 100 NR_117812.1
BACCN-4 99,18 99 MT515967.1
BAN-3 99,24 99 MT464347.1
BAN-4 99,18 99 MT545142.1
Nota. Resultados comparados con la base de datos GenBank (NCBI). Fuente: Vanoni (2024).
En cuanto a la capacidad probiótica, la Figura 2 muestra la cinética de crecimiento de ocho cepas en
condiciones de acidez. Los resultados evidencian que las cepas BACCN-3, BACCN-4, BAN-3 y BAN-
4 presentaron un crecimiento estable incluso en valores bajos de pH, lo que demuestra su capacidad de
tolerar ambientes hostiles similares a los del tracto gastrointestinal. Asimismo, las pruebas
complementarias de tolerancia a bilis y autoagregación indicaron que las cepas seleccionadas poseen
propiedades que refuerzan su viabilidad como probióticos
Análisis
La identificación molecular mediante la secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas más
destacadas corresponden a Lactobacillus acidophilus, especie ampliamente documentada en la literatura
científica por sus beneficios en la salud intestinal y su capacidad de inhibir patógenos entéricos
(Hernández et al., 2021). La alta identidad genética (≥ 99 %) respalda la fiabilidad del análisis y permite
clasificar los aislamientos dentro de un grupo con historial seguro de uso en alimentos.
La evaluación de la cinética de crecimiento bajo condiciones ácidas evidenció que las cepas mantienen
su viabilidad en entornos similares al jugo gástrico, lo que representa un criterio esencial en la selección
de probióticos de uso humano (Corrales Benedetti & Arias Palacios, 2020). De igual forma, su tolerancia
a bilis y su capacidad de autoagregación y co-agregación con bacterias patógenas sugieren un alto
potencial para competir y establecerse en el intestino.
pág. 9144
DISCUSIÓN
La caracterización inicial de los aislamientos demostró que las cepas recuperadas del mucílago de cacao
corresponden a bacterias Gram positivas y catalasa positivas, lo cual coincide con lo descrito en la
literatura para especies de Lactobacillus y Lactococcus frecuentemente asociadas a fermentaciones
vegetales (Bou et al., 2011; Bado, 2022). El hallazgo de actividad ureasa en varias cepas sugiere
adaptaciones metabólicas a sustratos ricos en compuestos nitrogenados, como es el caso del mucílago
de cacao, tal como lo señalan estudios previos en ambientes agrícolas (Castro, 2023). La confirmación
mediante pruebas bioquímicas básicas y la evidencia gráfica obtenida refuerzan la importancia de
emplear una aproximación multifactorial en la identificación preliminar de bacterias ácido lácticas.
En cuanto a los ensayos de susceptibilidad a antibióticos, las cepas mostraron un perfil caracterizado
por sensibilidad alta frente a ampicilina y tetraciclina, y sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y
eritromicina. Estos resultados son consistentes con investigaciones realizadas en BAL de bebidas
tradicionales y productos fermentados, donde se destaca que la resistencia intrínseca es poco frecuente
y la susceptibilidad es la norma en cepas seleccionadas para uso probiótico (Aka et al., 2020; Corrales
Benedetti & Arias Palacios, 2020). La resistencia parcial observada frente a gentamicina podría estar
asociada a mecanismos adaptativos propios de las condiciones del sustrato, pero no representa una
limitación significativa, siempre que no implique transferencia de genes de resistencia, criterio que debe
evaluarse en futuros estudios. Este perfil de susceptibilidad es un argumento favorable para la inocuidad
de las cepas y su potencial aplicación en alimentos.
La identificación molecular mediante secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas BACCN-
3, BACCN-4, BAN-3 y BAN-4 presentan entre un 99 y 100 % de identidad con Lactobacillus
acidophilus, una de las especies más reconocidas a nivel internacional por sus propiedades probióticas
y su uso seguro en alimentos funcionales (Hernández-González et al., 2021). Estos resultados no solo
validan la caracterización bioquímica previa, sino que también consolidan la clasificación taxonómica
de los aislamientos dentro de un grupo con historial GRAS (Generally Recognized As Safe).
Finalmente, la evaluación de la capacidad probiótica reveló que las cepas seleccionadas mantienen su
viabilidad en condiciones de acidez y toleran la presencia de bilis, características que son indispensables
para garantizar la supervivencia en el tracto gastrointestinal humano. La autoagregación y co-agregación
DISCUSIÓN
La caracterización inicial de los aislamientos demostró que las cepas recuperadas del mucílago de cacao
corresponden a bacterias Gram positivas y catalasa positivas, lo cual coincide con lo descrito en la
literatura para especies de Lactobacillus y Lactococcus frecuentemente asociadas a fermentaciones
vegetales (Bou et al., 2011; Bado, 2022). El hallazgo de actividad ureasa en varias cepas sugiere
adaptaciones metabólicas a sustratos ricos en compuestos nitrogenados, como es el caso del mucílago
de cacao, tal como lo señalan estudios previos en ambientes agrícolas (Castro, 2023). La confirmación
mediante pruebas bioquímicas básicas y la evidencia gráfica obtenida refuerzan la importancia de
emplear una aproximación multifactorial en la identificación preliminar de bacterias ácido lácticas.
En cuanto a los ensayos de susceptibilidad a antibióticos, las cepas mostraron un perfil caracterizado
por sensibilidad alta frente a ampicilina y tetraciclina, y sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y
eritromicina. Estos resultados son consistentes con investigaciones realizadas en BAL de bebidas
tradicionales y productos fermentados, donde se destaca que la resistencia intrínseca es poco frecuente
y la susceptibilidad es la norma en cepas seleccionadas para uso probiótico (Aka et al., 2020; Corrales
Benedetti & Arias Palacios, 2020). La resistencia parcial observada frente a gentamicina podría estar
asociada a mecanismos adaptativos propios de las condiciones del sustrato, pero no representa una
limitación significativa, siempre que no implique transferencia de genes de resistencia, criterio que debe
evaluarse en futuros estudios. Este perfil de susceptibilidad es un argumento favorable para la inocuidad
de las cepas y su potencial aplicación en alimentos.
La identificación molecular mediante secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas BACCN-
3, BACCN-4, BAN-3 y BAN-4 presentan entre un 99 y 100 % de identidad con Lactobacillus
acidophilus, una de las especies más reconocidas a nivel internacional por sus propiedades probióticas
y su uso seguro en alimentos funcionales (Hernández-González et al., 2021). Estos resultados no solo
validan la caracterización bioquímica previa, sino que también consolidan la clasificación taxonómica
de los aislamientos dentro de un grupo con historial GRAS (Generally Recognized As Safe).
Finalmente, la evaluación de la capacidad probiótica reveló que las cepas seleccionadas mantienen su
viabilidad en condiciones de acidez y toleran la presencia de bilis, características que son indispensables
para garantizar la supervivencia en el tracto gastrointestinal humano. La autoagregación y co-agregación
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frente a bacterias patógenas como Escherichia coli y Salmonella enterica sugieren que estos
aislamientos pueden competir eficazmente en el entorno intestinal, reduciendo la colonización de
microorganismos indeseables. Estos hallazgos son coherentes con los trabajos de Flores-Maciel et al.
(2024), quienes destacan la relevancia de las BAL productoras de exopolisacáridos en la modulación de
la microbiota intestinal y en la estabilidad tecnológica de alimentos fermentados.
Los resultados de esta investigación demuestran que el mucílago de cacao constituye una fuente valiosa
de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico. Su aprovechamiento no solo permitiría reducir el
impacto ambiental de un subproducto agrícola frecuentemente desaprovechado, sino también añadir
valor a la cadena productiva del cacao en Ecuador, aportando innovación biotecnológica con proyección
internacional.
CONCLUSIONES
La caracterización morfoquímica y bioquímica de los aislamientos obtenidos del mucílago de cacao
(Theobroma cacao L.) permitió establecer que se trata de bacterias ácido lácticas con rasgos consistentes
a bacilos Gram positivos, catalasas positivas y con actividad ureasa. Estos resultados confirman que el
mucílago de cacao constituye un ecosistema microbiano diverso y rico en microorganismos de interés
biotecnológico. El hallazgo de estas características no solo valida la utilidad de pruebas básicas de
laboratorio como primera aproximación, sino que también evidencia el potencial del mucílago,
tradicionalmente considerado un desecho agrícola, como fuente sostenible de cepas de relevancia
industrial y funcional.
Los ensayos de susceptibilidad a antibióticos demostraron un perfil de sensibilidad favorable en las
cepas aisladas, especialmente frente a ampicilina y tetraciclina, lo que garantiza su inocuidad y minimiza
el riesgo de transferencia de resistencia a patógenos clínicamente importantes. La resistencia parcial
observada a gentamicina y la sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y eritromicina concuerdan
con reportes internacionales sobre bacterias ácido lácticas de origen vegetal, lo cual sugiere que estas
adaptaciones no representan limitaciones para su aplicación en el área alimentaria. Estos resultados
respaldan la idea de que el mucílago de cacao puede ser una alternativa innovadora para la obtención de
probióticos seguros y confiables, alineados con los estándares de calidad y seguridad que exige la
industria biotecnológica y alimentaria.
frente a bacterias patógenas como Escherichia coli y Salmonella enterica sugieren que estos
aislamientos pueden competir eficazmente en el entorno intestinal, reduciendo la colonización de
microorganismos indeseables. Estos hallazgos son coherentes con los trabajos de Flores-Maciel et al.
(2024), quienes destacan la relevancia de las BAL productoras de exopolisacáridos en la modulación de
la microbiota intestinal y en la estabilidad tecnológica de alimentos fermentados.
Los resultados de esta investigación demuestran que el mucílago de cacao constituye una fuente valiosa
de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico. Su aprovechamiento no solo permitiría reducir el
impacto ambiental de un subproducto agrícola frecuentemente desaprovechado, sino también añadir
valor a la cadena productiva del cacao en Ecuador, aportando innovación biotecnológica con proyección
internacional.
CONCLUSIONES
La caracterización morfoquímica y bioquímica de los aislamientos obtenidos del mucílago de cacao
(Theobroma cacao L.) permitió establecer que se trata de bacterias ácido lácticas con rasgos consistentes
a bacilos Gram positivos, catalasas positivas y con actividad ureasa. Estos resultados confirman que el
mucílago de cacao constituye un ecosistema microbiano diverso y rico en microorganismos de interés
biotecnológico. El hallazgo de estas características no solo valida la utilidad de pruebas básicas de
laboratorio como primera aproximación, sino que también evidencia el potencial del mucílago,
tradicionalmente considerado un desecho agrícola, como fuente sostenible de cepas de relevancia
industrial y funcional.
Los ensayos de susceptibilidad a antibióticos demostraron un perfil de sensibilidad favorable en las
cepas aisladas, especialmente frente a ampicilina y tetraciclina, lo que garantiza su inocuidad y minimiza
el riesgo de transferencia de resistencia a patógenos clínicamente importantes. La resistencia parcial
observada a gentamicina y la sensibilidad intermedia frente a cloranfenicol y eritromicina concuerdan
con reportes internacionales sobre bacterias ácido lácticas de origen vegetal, lo cual sugiere que estas
adaptaciones no representan limitaciones para su aplicación en el área alimentaria. Estos resultados
respaldan la idea de que el mucílago de cacao puede ser una alternativa innovadora para la obtención de
probióticos seguros y confiables, alineados con los estándares de calidad y seguridad que exige la
industria biotecnológica y alimentaria.
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La identificación molecular mediante la secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas
seleccionadas corresponden a Lactobacillus acidophilus, especie ampliamente reconocida a nivel
mundial por sus beneficios sobre la salud intestinal y su inclusión en la categoría GRAS (Generally
Recognized As Safe). El desempeño positivo de estas cepas en pruebas de tolerancia a condiciones
gastrointestinales simuladas, así como en autoagregación y co-agregación frente a bacterias patógenas,
refuerza su potencial para integrarse en el desarrollo de alimentos funcionales y suplementos
probióticos. Además, la valorización del mucílago de cacao como fuente de probióticos representa una
oportunidad estratégica para Ecuador, al transformar un subproducto agrícola subutilizado en un insumo
de alto valor agregado, fortaleciendo la sostenibilidad y competitividad de la cadena cacaotera nacional
en el contexto internacional.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Aka, S., Dridi, B., Bolotin, A., Yapo, E. A., Koussemon-Camara, M., Bonfoh, B., & Renault, P. (2020).
Characterization of lactic acid bacteria isolated from a traditional Ivoirian beer process to
develop starter cultures for safe sorghum-based beverages. International Journal of Food
Microbiology, 322, 108547. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2020.108547
Alvarado Rivas, C., Chacón Rueda, Z., Otoniel Rojas, J., Guerrero Cárdenas, B., & López Corcuera, G.
(2007). Aislamiento, identificación y caracterización de bacterias ácido lácticas de un queso
venezolano ahumado andino artesanal. Su uso como cultivo iniciador. Revista Científica, 17(3),
301–308.
Anillo, R., & María, L. (2023). Capacidad bioconservante de bacterias ácido lácticas y/o metabolitos en
productos pesqueros y sus derivados. Repositorio UNAD.
http://repository.unad.edu.co/handle/10596/60072
Bado, M. J. C. (2022). La importancia de realizar una correcta tinción de Gram en la identificación
bacteriana.
Bautista, J. H. G. (2020). Producción de cacao (Theobroma cacao L.) fino o de aroma peruano:
Agronegocio sostenible. Alpha Centauri, 1(1), 49–55.
La identificación molecular mediante la secuenciación del gen ARNr 16S confirmó que las cepas
seleccionadas corresponden a Lactobacillus acidophilus, especie ampliamente reconocida a nivel
mundial por sus beneficios sobre la salud intestinal y su inclusión en la categoría GRAS (Generally
Recognized As Safe). El desempeño positivo de estas cepas en pruebas de tolerancia a condiciones
gastrointestinales simuladas, así como en autoagregación y co-agregación frente a bacterias patógenas,
refuerza su potencial para integrarse en el desarrollo de alimentos funcionales y suplementos
probióticos. Además, la valorización del mucílago de cacao como fuente de probióticos representa una
oportunidad estratégica para Ecuador, al transformar un subproducto agrícola subutilizado en un insumo
de alto valor agregado, fortaleciendo la sostenibilidad y competitividad de la cadena cacaotera nacional
en el contexto internacional.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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develop starter cultures for safe sorghum-based beverages. International Journal of Food
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(2007). Aislamiento, identificación y caracterización de bacterias ácido lácticas de un queso
venezolano ahumado andino artesanal. Su uso como cultivo iniciador. Revista Científica, 17(3),
301–308.
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bacteriana.
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pág. 9147
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de cacao como inoculante en la elaboración de queso semiduro. Universidad Ciencia y
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pág. 9148
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Gia, G. M., Chavez, B. A. M., Mendoza, V. V. B., & Guanuche, R. E. R. (2023). Análisis de ventaja
competitiva y comparativa del cacao ecuatoriano frente a países de la región. s.l., s.e., 83–94.
Hernández-González, J. C., Martínez-Tapia, A., Lazcano-Hernández, G., García-Pérez, B. E., &
Castrejón-Jiménez, N. S. (2021). Bacteriocins from lactic acid bacteria: A powerful alternative
as antimicrobials, probiotics, and immunomodulators in veterinary medicine. Animals, 11(4),
979.
https://doi.org/10.37135/ns.01.08.10
Gia, G. M., Chavez, B. A. M., Mendoza, V. V. B., & Guanuche, R. E. R. (2023). Análisis de ventaja
competitiva y comparativa del cacao ecuatoriano frente a países de la región. s.l., s.e., 83–94.
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