PRECISIÓN DIAGNÓSTICA Y EFICIENCIA
OPERATIVA DE LA INMUNODIFUSIÓN EN GEL
DE AGAR-AGID, FRENTE AL ELISA EN LA
VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA DE LA ANEMIA
INFECCIOSA EQUINA
DIAGNOSTIC ACCURACY AND OPERATIONAL EFFICIENCY OF AGAR
GEL IMMUNODIFFUSION VERSUS ELISA IN THE EPIDEMIOLOGICAL
SURVEILLANCE OF EQUINE INFECTIOUS ANEMIA
Nelsón Catito Cabrera Solorzano
Universidad Estatal de Milagro, Ecuador
María Nicole Vanegas Brito
Universidad Estatal de Milagro, Ecuador
Juan Pablo Durán Tórres
Agencia de Regulación y Control Fito y Zoosanitario
Manuel Alejandro Fiallos Cárdenas
Universidad Estatal de Milagro, Facultad de Salud y Servicios Sociales, Milagro, 091050, Provincia del
Guayas, Ecuador
Antonio Sebastián Cabrera Tello
Universidad Estatal de Milagro – UNEMI, Ecuador
José Manuel Pico Zerna
Instituto Nacional de Investigación en Salud Pública, Ecuador
pág. 6453
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i5.20004
Precisión Diagnóstica y Eficiencia Operativa de la Inmunodifusión en Gel
de Agar-AGID, frente al ELISA en la Vigilancia Epidemiológica de la
Anemia Infecciosa Equina
Nelsón Catito Cabrera Solorzano1
nelson.cabrera@agrocalidad.gob.ec
https://orcid.org/0000-0003-4574-2289
Facultad de Posgrados, Escuela de Salud,
Maestría en Biotecnología, Universidad Estatal
de Milagro, Ecuador
María Nicole Vanegas Brito
marianicolev@gmail.com
https://orcid.org/0009-0008-3431-6763
Facultad de Posgrados, Escuela de Salud,
Maestría en Biotecnología, Universidad Estatal
de Milagro, Ecuador
Juan Pablo Durán Tórres
juan.duran@agrocalidad.gob.ec
https://orcid.org/0009-0005-6450-4595
Agencia de Regulación y Control Fito y
Zoosanitario
Manuel Alejandro Fiallos Cárdenas
mfiallosc@unemi.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-3711-2041
Universidad Estatal de Milagro, Facultad de
Salud y Servicios Sociales, Milagro, 091050,
Provincia del Guayas, Ecuador
Antonio Sebastián Cabrera Tello
acabrerat3@unemi.edu.ec
https://orcid.org/0009-0009-9972-2129
Ingeniería en Biotecnología
Universidad Estatal de Milagro - UNEMI
Ecuador
José Manuel Pico Zerna
picozerna@gmail.com
https://orcid.org/0000-0002-8831-982X
Instituto Nacional de Investigación en
Salud Pública Leopoldo Izquieta Pérez
Ecuador
RESUMEN
La anemia infecciosa equina (AIE) es una enfermedad viral crónica que compromete la salud equina y
genera restricciones en el comercio internacional. El diagnóstico temprano es fundamental para un
control eficaz. El objetivo de este estudio fue comparar el rendimiento diagnóstico de dos métodos
serológicos: la inmunodifusión en gel de agar AGID y el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
(ELISA). Se analizaron 60 muestras de suero equino (30 positivas y 30 negativas) procedentes de
materiales de referencia validados por un laboratorio oficial de diagnóstico veterinario. Ambas técnicas
alcanzaron una sensibilidad y especificidad del 100 %, con una concordancia diagnóstica perfecta (κ =
1,0), sin encontrarse diferencias significativas en su capacidad diagnóstica (p = 1,0). Sin embargo, el
ELISA demostró un tiempo de reacción menor (24 horas) en comparación con el AGID (72 horas) (p <
0,05), siendo ELISA significativamente más costoso (21,51 USD frente a 9,36 USD) (p < 0,05). Estos
hallazgos evidencian que ambas técnicas son altamente confiables; no obstante, la elección depende de
los recursos disponibles y requerimientos operativos de cada laboratorio. Se recomienda un enfoque
diagnóstico combinado, empleando ELISA como prueba de cribado y AGID como confirmatoria,
fortaleciendo la vigilancia epidemiológica y la gestión sanitaria equina.
Palabras clave: anemia infecciosa equina, elisa, inmunodifusión en gel de agar (agid), diagnóstico
serológico
1 Autor principal
Correspondencia: nelson.cabrera@agrocalidad.gob.ec
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i5.20004
Precisión Diagnóstica y Eficiencia Operativa de la Inmunodifusión en Gel
de Agar-AGID, frente al ELISA en la Vigilancia Epidemiológica de la
Anemia Infecciosa Equina
Nelsón Catito Cabrera Solorzano1
nelson.cabrera@agrocalidad.gob.ec
https://orcid.org/0000-0003-4574-2289
Facultad de Posgrados, Escuela de Salud,
Maestría en Biotecnología, Universidad Estatal
de Milagro, Ecuador
María Nicole Vanegas Brito
marianicolev@gmail.com
https://orcid.org/0009-0008-3431-6763
Facultad de Posgrados, Escuela de Salud,
Maestría en Biotecnología, Universidad Estatal
de Milagro, Ecuador
Juan Pablo Durán Tórres
juan.duran@agrocalidad.gob.ec
https://orcid.org/0009-0005-6450-4595
Agencia de Regulación y Control Fito y
Zoosanitario
Manuel Alejandro Fiallos Cárdenas
mfiallosc@unemi.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-3711-2041
Universidad Estatal de Milagro, Facultad de
Salud y Servicios Sociales, Milagro, 091050,
Provincia del Guayas, Ecuador
Antonio Sebastián Cabrera Tello
acabrerat3@unemi.edu.ec
https://orcid.org/0009-0009-9972-2129
Ingeniería en Biotecnología
Universidad Estatal de Milagro - UNEMI
Ecuador
José Manuel Pico Zerna
picozerna@gmail.com
https://orcid.org/0000-0002-8831-982X
Instituto Nacional de Investigación en
Salud Pública Leopoldo Izquieta Pérez
Ecuador
RESUMEN
La anemia infecciosa equina (AIE) es una enfermedad viral crónica que compromete la salud equina y
genera restricciones en el comercio internacional. El diagnóstico temprano es fundamental para un
control eficaz. El objetivo de este estudio fue comparar el rendimiento diagnóstico de dos métodos
serológicos: la inmunodifusión en gel de agar AGID y el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
(ELISA). Se analizaron 60 muestras de suero equino (30 positivas y 30 negativas) procedentes de
materiales de referencia validados por un laboratorio oficial de diagnóstico veterinario. Ambas técnicas
alcanzaron una sensibilidad y especificidad del 100 %, con una concordancia diagnóstica perfecta (κ =
1,0), sin encontrarse diferencias significativas en su capacidad diagnóstica (p = 1,0). Sin embargo, el
ELISA demostró un tiempo de reacción menor (24 horas) en comparación con el AGID (72 horas) (p <
0,05), siendo ELISA significativamente más costoso (21,51 USD frente a 9,36 USD) (p < 0,05). Estos
hallazgos evidencian que ambas técnicas son altamente confiables; no obstante, la elección depende de
los recursos disponibles y requerimientos operativos de cada laboratorio. Se recomienda un enfoque
diagnóstico combinado, empleando ELISA como prueba de cribado y AGID como confirmatoria,
fortaleciendo la vigilancia epidemiológica y la gestión sanitaria equina.
Palabras clave: anemia infecciosa equina, elisa, inmunodifusión en gel de agar (agid), diagnóstico
serológico
1 Autor principal
Correspondencia: nelson.cabrera@agrocalidad.gob.ec
pág. 6454
Diagnostic Accuracy and Operational Efficiency of Agar Gel
Immunodiffusion versus ELISA in the Epidemiological Surveillance of
Equine Infectious Anemia
ABSTRACT
Equine infectious anemia (EIA) is a chronic viral disease that compromises equine health and imposes
restrictions on international trade. Early diagnosis is essential for effective control. The aim of this study
was to compare the diagnostic performance of two serological methods: agar gel immunodiffusion
(AGID) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A total of 60 equine serum samples (30
positive and 30 negative) were analyzed, obtained from validated reference materials provided by an
official veterinary diagnostic laboratory. Both techniques achieved 100% sensitivity and specificity,
with perfect diagnostic agreement (κ = 1.0), showing no statistically significant differences in diagnostic
capacity (p = 1.0). However, ELISA demonstrated a significantly shorter response time (24 hours)
compared with AGID (72 hours) (p < 0.05), while being notably more expensive (USD 21.51 vs. USD
9.36) (p < 0.05). These findings confirm that both assays are highly reliable under controlled conditions;
nevertheless, the choice of method depends on available resources and operational requirements of each
laboratory. A combined diagnostic approach is recommended, employing ELISA as a screening test
and AGID as a confirmatory assay, thereby strengthening epidemiological surveillance and equine
health management.
Keywords: equine infectious anemia, elisa, agar gel immunodiffusion (agid), serological diagnosis
Artículo recibido 05 setiembre 2025
Aceptado para publicación: 09 octubre 2025
Diagnostic Accuracy and Operational Efficiency of Agar Gel
Immunodiffusion versus ELISA in the Epidemiological Surveillance of
Equine Infectious Anemia
ABSTRACT
Equine infectious anemia (EIA) is a chronic viral disease that compromises equine health and imposes
restrictions on international trade. Early diagnosis is essential for effective control. The aim of this study
was to compare the diagnostic performance of two serological methods: agar gel immunodiffusion
(AGID) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A total of 60 equine serum samples (30
positive and 30 negative) were analyzed, obtained from validated reference materials provided by an
official veterinary diagnostic laboratory. Both techniques achieved 100% sensitivity and specificity,
with perfect diagnostic agreement (κ = 1.0), showing no statistically significant differences in diagnostic
capacity (p = 1.0). However, ELISA demonstrated a significantly shorter response time (24 hours)
compared with AGID (72 hours) (p < 0.05), while being notably more expensive (USD 21.51 vs. USD
9.36) (p < 0.05). These findings confirm that both assays are highly reliable under controlled conditions;
nevertheless, the choice of method depends on available resources and operational requirements of each
laboratory. A combined diagnostic approach is recommended, employing ELISA as a screening test
and AGID as a confirmatory assay, thereby strengthening epidemiological surveillance and equine
health management.
Keywords: equine infectious anemia, elisa, agar gel immunodiffusion (agid), serological diagnosis
Artículo recibido 05 setiembre 2025
Aceptado para publicación: 09 octubre 2025
pág. 6455
INTRODUCCIÓN
La anemia infecciosa equina (AIE) es una enfermedad viral crónica causada por el virus de la anemia
infecciosa equina (VAIE) (Vallejo Romero, y otros, 2021), un lentivirus de la familia Retroviridae que
afecta exclusivamente a equidos (Alvarez, Cipolini, Wigdorovitz, Trono, & Barrandeguy, 2015) (Cécile
Schimmich, 2024), el agente etiológico tiene tropismo por los macrófagos del sistema inmune
(Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025).El periodo de incubación puede variar entre
una a cuatro semanas. La enfermedad puede manifestarse con síntomas agudos, que a menudo son
precedidos por una fase asintomática prolongada, lo que convierte a estos individuos en reservorios
potenciales de transmisión del virus dentro de las poblaciones equinas (Gustavo Machado, 2021). El
impacto en la salud equina y la restricciones en el comercio internacional representa un reto para las
autoridades de control sanitario animal (Sandrigo, Martínez, Cipolini, Storani, & Espasandin, 2021).
Su transmisión es causada principalmente por vectores hematófagos tales como Tabanus spp. y
Stomoxys calcitrans, sin embargo, también puede darse por contacto directo con fluidos corporales
contaminados, mediante la realización de procedimientos invasivos con material no estéril o por
transmisión vertical, de madre a cría (Centro di Referenza Nazionale per l'Anemia Infettiva Equina,
2025), (Thieulent, y otros, 2025) es por ello, que todos los líquidos y tejidos corporales deben
contemplarse como potencialmente infecciosos, especialmente cuando se presentan episodios febriles
con niveles virales elevados (Merck & Co., Inc, 2020), sin embargo, (Bruno Rodrigues de Pádua, 2022)
determinaron que existen factores de riesgos iatrogénicos y ambientales que están asociados con la
aparición de la enfermedad. La epidemiologìa está sujeta a variaciones ecológicas y ambientales, la
presencia de hematófagos, prácticas de manejo y densidad de la población de équidos (Valdir Vieira da
Silva, 2025). Esta condición clínica, se caracteriza por episodios recurrentes de anemia, fiebre, pérdida
progresiva de peso y desmejoramiento de la condición corporal (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, &
Cala Delgado, 2025). Los équidos infectados con AIE presentan una relación directamente
proporcional entre la carga viral y la severidad de los signos clínicos, es decir, a mayor carga viral,
mayor es la severidad de los signos clínicos (Merck & Co., Inc, 2020). La importancia de esta
enfermedad constituye un problema sanitario de gran relevancia al generar portadores asintomáticos
que continúan siendo fuente de contagio durante toda la vida del animal, debido a que el virus puede
INTRODUCCIÓN
La anemia infecciosa equina (AIE) es una enfermedad viral crónica causada por el virus de la anemia
infecciosa equina (VAIE) (Vallejo Romero, y otros, 2021), un lentivirus de la familia Retroviridae que
afecta exclusivamente a equidos (Alvarez, Cipolini, Wigdorovitz, Trono, & Barrandeguy, 2015) (Cécile
Schimmich, 2024), el agente etiológico tiene tropismo por los macrófagos del sistema inmune
(Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025).El periodo de incubación puede variar entre
una a cuatro semanas. La enfermedad puede manifestarse con síntomas agudos, que a menudo son
precedidos por una fase asintomática prolongada, lo que convierte a estos individuos en reservorios
potenciales de transmisión del virus dentro de las poblaciones equinas (Gustavo Machado, 2021). El
impacto en la salud equina y la restricciones en el comercio internacional representa un reto para las
autoridades de control sanitario animal (Sandrigo, Martínez, Cipolini, Storani, & Espasandin, 2021).
Su transmisión es causada principalmente por vectores hematófagos tales como Tabanus spp. y
Stomoxys calcitrans, sin embargo, también puede darse por contacto directo con fluidos corporales
contaminados, mediante la realización de procedimientos invasivos con material no estéril o por
transmisión vertical, de madre a cría (Centro di Referenza Nazionale per l'Anemia Infettiva Equina,
2025), (Thieulent, y otros, 2025) es por ello, que todos los líquidos y tejidos corporales deben
contemplarse como potencialmente infecciosos, especialmente cuando se presentan episodios febriles
con niveles virales elevados (Merck & Co., Inc, 2020), sin embargo, (Bruno Rodrigues de Pádua, 2022)
determinaron que existen factores de riesgos iatrogénicos y ambientales que están asociados con la
aparición de la enfermedad. La epidemiologìa está sujeta a variaciones ecológicas y ambientales, la
presencia de hematófagos, prácticas de manejo y densidad de la población de équidos (Valdir Vieira da
Silva, 2025). Esta condición clínica, se caracteriza por episodios recurrentes de anemia, fiebre, pérdida
progresiva de peso y desmejoramiento de la condición corporal (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, &
Cala Delgado, 2025). Los équidos infectados con AIE presentan una relación directamente
proporcional entre la carga viral y la severidad de los signos clínicos, es decir, a mayor carga viral,
mayor es la severidad de los signos clínicos (Merck & Co., Inc, 2020). La importancia de esta
enfermedad constituye un problema sanitario de gran relevancia al generar portadores asintomáticos
que continúan siendo fuente de contagio durante toda la vida del animal, debido a que el virus puede
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permanecer en los leucocitos y plasma sanguíneo durante los estados febriles y de viremia,
representando un alto riesgo para los animales sanos (Milián-Belloso, Lepe-López, & Godoy, 2024).
El impacto de la AIE trasciende el ámbito veterinario, ya que compromete el bienestar equino, limita la
participación en actividades deportivas y recreativas y condiciona la movilización internacional de
animales, al estar incluida en la lista de enfermedades de notificación obligatoria (WOAH, 2025)
(Sarah-Jo Paquette, 2025). En consecuencia, la detección temprana y precisa de esta enfermedad es
indispensable para implementar medidas de control eficientes, establecer cuarentenas, diseñar
programas de vigilancia epidemiológica y garantizar la seguridad en el comercio internacional de
équidos (Villa-Mancera , y otros, 2024).
En el diagnóstico serológico de la AIE, la inmunodifusión en gel de agar (AGID o prueba de Coggins)
ha sido históricamente considerada el estándar de referencia por su elevada especificidad y aceptación
internacional (Ibarra Zazueta, y otros, 2025). Sin embargo, presenta limitaciones operativas, entre ellas
la necesidad de personal capacitado, un tiempo de respuesta relativamente prolongado (48–72 horas) y
la dificultad de procesar grandes volúmenes de muestras en contextos de vigilancia masiva (Rodríguez
Domínguez, y otros, 2021). Por otro lado, el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) ofrece
ventajas operativas significativas, como rapidez, automatización y capacidad de procesamiento en alto
rendimiento, lo que lo convierte en una alternativa atractiva en laboratorios con alta demanda (Márquez-
Alvarado, y otros, 2015) . No obstante, diversos autores han señalado que el ELISA puede generar
falsos positivos y, por lo tanto, requiere confirmación con AGID para consolidar la fiabilidad
diagnóstica (Scicluna, y otros, 2019) (Espasandin, y otros, 2021).
Estudios internacionales respaldan la utilidad de ambas técnicas. (Villa-Mancera , y otros, 2024)
demostraron una alta concordancia entre ELISA e AGID en poblaciones equinas de México, mientras
que (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025) reportaron índices kappa superiores a 0,9
al comparar variantes de ELISA con la AGID clásica. De forma similar, (Sandrigo, Martínez, Cipolini,
Storani, & Espasandin, 2021) confirmaron la eficacia de ELISA de competición en equinos de
Argentina, aunque enfatizaron la importancia de su validación local. En Ecuador, la información sobre
comparaciones sistemáticas entre ambas pruebas es escasa, pese a que Agrocalidad mantiene a la AGID
como método oficial de referencia (Agrocalidad, 2016).
permanecer en los leucocitos y plasma sanguíneo durante los estados febriles y de viremia,
representando un alto riesgo para los animales sanos (Milián-Belloso, Lepe-López, & Godoy, 2024).
El impacto de la AIE trasciende el ámbito veterinario, ya que compromete el bienestar equino, limita la
participación en actividades deportivas y recreativas y condiciona la movilización internacional de
animales, al estar incluida en la lista de enfermedades de notificación obligatoria (WOAH, 2025)
(Sarah-Jo Paquette, 2025). En consecuencia, la detección temprana y precisa de esta enfermedad es
indispensable para implementar medidas de control eficientes, establecer cuarentenas, diseñar
programas de vigilancia epidemiológica y garantizar la seguridad en el comercio internacional de
équidos (Villa-Mancera , y otros, 2024).
En el diagnóstico serológico de la AIE, la inmunodifusión en gel de agar (AGID o prueba de Coggins)
ha sido históricamente considerada el estándar de referencia por su elevada especificidad y aceptación
internacional (Ibarra Zazueta, y otros, 2025). Sin embargo, presenta limitaciones operativas, entre ellas
la necesidad de personal capacitado, un tiempo de respuesta relativamente prolongado (48–72 horas) y
la dificultad de procesar grandes volúmenes de muestras en contextos de vigilancia masiva (Rodríguez
Domínguez, y otros, 2021). Por otro lado, el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) ofrece
ventajas operativas significativas, como rapidez, automatización y capacidad de procesamiento en alto
rendimiento, lo que lo convierte en una alternativa atractiva en laboratorios con alta demanda (Márquez-
Alvarado, y otros, 2015) . No obstante, diversos autores han señalado que el ELISA puede generar
falsos positivos y, por lo tanto, requiere confirmación con AGID para consolidar la fiabilidad
diagnóstica (Scicluna, y otros, 2019) (Espasandin, y otros, 2021).
Estudios internacionales respaldan la utilidad de ambas técnicas. (Villa-Mancera , y otros, 2024)
demostraron una alta concordancia entre ELISA e AGID en poblaciones equinas de México, mientras
que (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025) reportaron índices kappa superiores a 0,9
al comparar variantes de ELISA con la AGID clásica. De forma similar, (Sandrigo, Martínez, Cipolini,
Storani, & Espasandin, 2021) confirmaron la eficacia de ELISA de competición en equinos de
Argentina, aunque enfatizaron la importancia de su validación local. En Ecuador, la información sobre
comparaciones sistemáticas entre ambas pruebas es escasa, pese a que Agrocalidad mantiene a la AGID
como método oficial de referencia (Agrocalidad, 2016).
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Este vacío de conocimiento resalta la necesidad de realizar investigaciones bajo condiciones controladas
que evalúen de manera objetiva la sensibilidad, especificidad, concordancia diagnóstica, costos y
tiempos de respuesta de AGID y ELISA (Maldonado, y otros, 2025). El presente estudio se propuso
comparar ambas pruebas en muestras de referencia positivas y negativas, generando evidencia científica
que contribuya a optimizar los protocolos diagnósticos, fortalecer la vigilancia epidemiológica y apoyar
la toma de decisiones regulatorias en el ámbito de la sanidad equina en Ecuador.
METODOLOGÍA
El presente estudio se desarrolló bajo un enfoque cuantitativo y un diseño observacional, transversal y
descriptivo-comparativo, con el objetivo de evaluar el rendimiento diagnóstico de dos pruebas
serológicas empleadas en la detección de Anemia Infecciosa Equina (AIE): inmunodifusión en gel de
agar (AGID) y el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).
La población de estudio estuvo conformada por muestras de suero equino, y la muestra final incluyó 60
sueros de referencia (30 positivos y 30 negativos), previamente validados por un laboratorio oficial de
diagnóstico veterinario acreditado en sanidad animal. La selección de estas muestras respondió a un
criterio intencional y controlado, garantizando la representatividad para la comparación metodológica.
Las técnicas de recolección de datos consistieron en la aplicación de los dos métodos serológicos bajo
condiciones de laboratorio estandarizadas. Para AGID se utilizaron kits comerciales aplicados según el
Manual de Pruebas Diagnósticas de la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, 2025), que
reconoce a esta técnica como prueba de referencia. Para ELISA se emplearon reactivos comerciales
validados internacionalmente y protocolos basados en estudios comparativos recientes (Domínguez-
Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025). La ejecución de ambas técnicas fue realizada por
profesionales especializados en diagnóstico veterinario.
Las variables analizadas incluyeron sensibilidad, especificidad, concordancia diagnóstica (índice
kappa), tiempo de respuesta (horas) y costos (USD por prueba). Para el análisis estadístico se aplicaron
pruebas de Fisher para la comparación de proporciones, Mann-Whitney para las diferencias de
medianas y el coeficiente kappa para evaluar el grado de concordancia entre pruebas, con un nivel de
significancia del 95 % (p < 0,05).
Este vacío de conocimiento resalta la necesidad de realizar investigaciones bajo condiciones controladas
que evalúen de manera objetiva la sensibilidad, especificidad, concordancia diagnóstica, costos y
tiempos de respuesta de AGID y ELISA (Maldonado, y otros, 2025). El presente estudio se propuso
comparar ambas pruebas en muestras de referencia positivas y negativas, generando evidencia científica
que contribuya a optimizar los protocolos diagnósticos, fortalecer la vigilancia epidemiológica y apoyar
la toma de decisiones regulatorias en el ámbito de la sanidad equina en Ecuador.
METODOLOGÍA
El presente estudio se desarrolló bajo un enfoque cuantitativo y un diseño observacional, transversal y
descriptivo-comparativo, con el objetivo de evaluar el rendimiento diagnóstico de dos pruebas
serológicas empleadas en la detección de Anemia Infecciosa Equina (AIE): inmunodifusión en gel de
agar (AGID) y el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).
La población de estudio estuvo conformada por muestras de suero equino, y la muestra final incluyó 60
sueros de referencia (30 positivos y 30 negativos), previamente validados por un laboratorio oficial de
diagnóstico veterinario acreditado en sanidad animal. La selección de estas muestras respondió a un
criterio intencional y controlado, garantizando la representatividad para la comparación metodológica.
Las técnicas de recolección de datos consistieron en la aplicación de los dos métodos serológicos bajo
condiciones de laboratorio estandarizadas. Para AGID se utilizaron kits comerciales aplicados según el
Manual de Pruebas Diagnósticas de la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, 2025), que
reconoce a esta técnica como prueba de referencia. Para ELISA se emplearon reactivos comerciales
validados internacionalmente y protocolos basados en estudios comparativos recientes (Domínguez-
Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado, 2025). La ejecución de ambas técnicas fue realizada por
profesionales especializados en diagnóstico veterinario.
Las variables analizadas incluyeron sensibilidad, especificidad, concordancia diagnóstica (índice
kappa), tiempo de respuesta (horas) y costos (USD por prueba). Para el análisis estadístico se aplicaron
pruebas de Fisher para la comparación de proporciones, Mann-Whitney para las diferencias de
medianas y el coeficiente kappa para evaluar el grado de concordancia entre pruebas, con un nivel de
significancia del 95 % (p < 0,05).
pág. 6458
En cuanto a las consideraciones éticas, se respetaron los lineamientos de bienestar animal establecidos
por la normativa nacional e internacional. No se realizaron procedimientos invasivos sobre animales,
dado que las muestras analizadas fueron obtenidas previamente y depositadas como material de
referencia en un laboratorio acreditado.
Los criterios de inclusión fueron: muestras séricas equinas con validación previa como positivas o
negativas a AIE en pruebas oficiales de referencia. Se excluyeron aquellas muestras con volúmenes
insuficientes, deterioradas o con historial de almacenamiento inadecuado.
RESULTADOS
Sensibilidad y especificidad
El estudio incluyó 60 muestras séricas, de las cuales 30 correspondieron a material de referencia
positivo (MRI-P) y 30 a material de referencia negativo (MRI-N). Ambas pruebas serológicas,
Inmunodifusión en Gel de Agar (AGID) y ELISA, detectaron correctamente la totalidad de muestras
positivas y negativas, presentando una sensibilidad y especificidad del 100 % (Tabla 1).
Tabla 1. Resultados diagnósticos de AGID y ELISA.
Técnica VP FN VN FP
AGID 30 0 30 0
ELISA 30 0 30 0
*VP (Verdadero Positivo); FN (Falso Negativo); VN (verdadero Negativo); FP (Falso Positivo)
No se registraron falsos positivos ni falsos negativos. La tabla de contingencia 2×2 (Tabla 2) confirma
que los resultados de ELISA coincidieron en su totalidad con los obtenidos mediante AGID.
Tabla 2. Tabla de contingencia 2×2 entre AGID y ELISA
AGID (+) AGID (–) Total
ELISA (+) 30a 0b 30
ELISA (–) 0c 30d 30
Total 30 30 60
a = verdaderos positivos; b = falsos positivos; c = falsos negativos; d = verdaderos negativos.
La prueba exacta de Fisher (p = 1,0) indicó ausencia de diferencias estadísticamente significativas entre
ambas técnicas.
En cuanto a las consideraciones éticas, se respetaron los lineamientos de bienestar animal establecidos
por la normativa nacional e internacional. No se realizaron procedimientos invasivos sobre animales,
dado que las muestras analizadas fueron obtenidas previamente y depositadas como material de
referencia en un laboratorio acreditado.
Los criterios de inclusión fueron: muestras séricas equinas con validación previa como positivas o
negativas a AIE en pruebas oficiales de referencia. Se excluyeron aquellas muestras con volúmenes
insuficientes, deterioradas o con historial de almacenamiento inadecuado.
RESULTADOS
Sensibilidad y especificidad
El estudio incluyó 60 muestras séricas, de las cuales 30 correspondieron a material de referencia
positivo (MRI-P) y 30 a material de referencia negativo (MRI-N). Ambas pruebas serológicas,
Inmunodifusión en Gel de Agar (AGID) y ELISA, detectaron correctamente la totalidad de muestras
positivas y negativas, presentando una sensibilidad y especificidad del 100 % (Tabla 1).
Tabla 1. Resultados diagnósticos de AGID y ELISA.
Técnica VP FN VN FP
AGID 30 0 30 0
ELISA 30 0 30 0
*VP (Verdadero Positivo); FN (Falso Negativo); VN (verdadero Negativo); FP (Falso Positivo)
No se registraron falsos positivos ni falsos negativos. La tabla de contingencia 2×2 (Tabla 2) confirma
que los resultados de ELISA coincidieron en su totalidad con los obtenidos mediante AGID.
Tabla 2. Tabla de contingencia 2×2 entre AGID y ELISA
AGID (+) AGID (–) Total
ELISA (+) 30a 0b 30
ELISA (–) 0c 30d 30
Total 30 30 60
a = verdaderos positivos; b = falsos positivos; c = falsos negativos; d = verdaderos negativos.
La prueba exacta de Fisher (p = 1,0) indicó ausencia de diferencias estadísticamente significativas entre
ambas técnicas.
pág. 6459
Concordancia diagnóstica
La concordancia entre AGID y ELISA se evaluó mediante el coeficiente kappa, obteniéndose un valor
de κ = 1,0 (p < 0,001), lo que evidencia concordancia perfecta sin discordancias (Tabla 3).
Tabla 3. Matriz de concordancia entre AGID y ELISA.
AGID (+) AGID (–) Total
ELISA (+) 30a 0b 30
ELISA (–) 0c 30d 30
Total 30 30 60
Estos hallazgos confirman que AGID y ELISA presentan equivalencia diagnóstica bajo condiciones
controladas y con material de referencia certificado.
Costos diagnósticos
El análisis comparativo de costos reveló diferencias significativas (U = 0; p = 0,0119). El costo
promedio por muestra de AGID fue de USD 9,36, mientras que para ELISA alcanzó USD 21,51 (Tablas
4 y 5)
Tabla 4. Costos por análisis AGID (USD/muestra)
Laboratorio Costo
Laboratorio oficial 9,34
Laboratorio privado 1 8,50
Laboratorio privado 2 10,00
Laboratorio privado 3 9,00
Investigación 9,95
Promedio 9,36
Tabla 5. Costos por análisis ELISA (USD/muestra)
Laboratorio Costo
Laboratorio oficial 15,00
Laboratorio privado 1 15,00
Investigación 1 15,70
Investigación 2 25,85
Investigación 3 36,00
Promedio 21,51
Estos datos evidencian que, si bien ambas pruebas son equivalentes en términos de precisión
diagnóstica, AGID resulta más costo-efectiva, lo que la hace adecuada para programas de diagnóstico
rutinario en contextos de recursos limitados.
Concordancia diagnóstica
La concordancia entre AGID y ELISA se evaluó mediante el coeficiente kappa, obteniéndose un valor
de κ = 1,0 (p < 0,001), lo que evidencia concordancia perfecta sin discordancias (Tabla 3).
Tabla 3. Matriz de concordancia entre AGID y ELISA.
AGID (+) AGID (–) Total
ELISA (+) 30a 0b 30
ELISA (–) 0c 30d 30
Total 30 30 60
Estos hallazgos confirman que AGID y ELISA presentan equivalencia diagnóstica bajo condiciones
controladas y con material de referencia certificado.
Costos diagnósticos
El análisis comparativo de costos reveló diferencias significativas (U = 0; p = 0,0119). El costo
promedio por muestra de AGID fue de USD 9,36, mientras que para ELISA alcanzó USD 21,51 (Tablas
4 y 5)
Tabla 4. Costos por análisis AGID (USD/muestra)
Laboratorio Costo
Laboratorio oficial 9,34
Laboratorio privado 1 8,50
Laboratorio privado 2 10,00
Laboratorio privado 3 9,00
Investigación 9,95
Promedio 9,36
Tabla 5. Costos por análisis ELISA (USD/muestra)
Laboratorio Costo
Laboratorio oficial 15,00
Laboratorio privado 1 15,00
Investigación 1 15,70
Investigación 2 25,85
Investigación 3 36,00
Promedio 21,51
Estos datos evidencian que, si bien ambas pruebas son equivalentes en términos de precisión
diagnóstica, AGID resulta más costo-efectiva, lo que la hace adecuada para programas de diagnóstico
rutinario en contextos de recursos limitados.
pág. 6460
Tiempo de respuesta
El análisis de tiempos mostró diferencias significativas (U = 25; p = 0,0039). El promedio de entrega
de resultados para AGID fue de 72 horas, mientras que ELISA requirió únicamente 24 horas (Tablas
6 y 7).
Tabla 6. Tiempo de respuesta AGID (horas).
Laboratorio Tiempo
Laboratorio oficial 72
Laboratorio privado 1 72
Laboratorio privado 2 72
Laboratorio privado 3 72
Investigación 72
Promedio 72
Tabla 7. Tiempo de respuesta ELISA (horas).
Laboratorio Tiempo
Laboratorio oficial 24
Laboratorio privado 1 24
Laboratorio privado 2 24
Laboratorio privado 3 24
Investigación 24
Promedio 24
Interpretación de resultados
En conjunto, los hallazgos del presente estudio indican que:
▪ Sensibilidad y especificidad: ambas pruebas alcanzaron un desempeño diagnóstico perfecto (100
%), sin falsos positivos ni negativos.
▪ Concordancia diagnóstica: el coeficiente κ = 1 confirma equivalencia total entre AGID y ELISA.
▪ Costos: AGID es significativamente más económica, lo que la convierte en una opción viable en
programas de diagnóstico masivo.
▪ Tiempo de respuesta: ELISA reduce el tiempo de entrega en 48 horas, representando una ventaja
operativa en emergencias epidemiológicas y tamizajes a gran escala.
Tiempo de respuesta
El análisis de tiempos mostró diferencias significativas (U = 25; p = 0,0039). El promedio de entrega
de resultados para AGID fue de 72 horas, mientras que ELISA requirió únicamente 24 horas (Tablas
6 y 7).
Tabla 6. Tiempo de respuesta AGID (horas).
Laboratorio Tiempo
Laboratorio oficial 72
Laboratorio privado 1 72
Laboratorio privado 2 72
Laboratorio privado 3 72
Investigación 72
Promedio 72
Tabla 7. Tiempo de respuesta ELISA (horas).
Laboratorio Tiempo
Laboratorio oficial 24
Laboratorio privado 1 24
Laboratorio privado 2 24
Laboratorio privado 3 24
Investigación 24
Promedio 24
Interpretación de resultados
En conjunto, los hallazgos del presente estudio indican que:
▪ Sensibilidad y especificidad: ambas pruebas alcanzaron un desempeño diagnóstico perfecto (100
%), sin falsos positivos ni negativos.
▪ Concordancia diagnóstica: el coeficiente κ = 1 confirma equivalencia total entre AGID y ELISA.
▪ Costos: AGID es significativamente más económica, lo que la convierte en una opción viable en
programas de diagnóstico masivo.
▪ Tiempo de respuesta: ELISA reduce el tiempo de entrega en 48 horas, representando una ventaja
operativa en emergencias epidemiológicas y tamizajes a gran escala.
pág. 6461
En consecuencia, la elección entre AGID y ELISA dependerá del contexto operativo: la AGID como
método confirmatorio oficial y costo-efectivo, y el ELISA como prueba de cribado rápida en escenarios
que demandan inmediatez.
DISCUSIÓN
El presente estudio evidenció que tanto la inmunodifusión en gel de agar (AGID) como el ensayo
inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) alcanzaron una sensibilidad y especificidad del 100 %,
sin registrar falsos positivos ni negativos. Estos hallazgos son consistentes con estudios internacionales
que han demostrado un alto rendimiento de ambas pruebas en el diagnóstico de la anemia infecciosa
equina (AIE). (Villa-Mancera , y otros, 2024) reportaron concordancia perfecta entre AGID y ELISA
en poblaciones equinas de México, mientras que (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado,
2025) documentaron índices κ superiores a 0,9 en escenarios de endemicidad.
La concordancia diagnóstica perfecta (κ = 1,0) encontrada en este trabajo respalda la posibilidad de
utilizar las dos pruebas de manera complementaria o intercambiable en condiciones de laboratorio
controladas. No obstante, debe subrayarse que la AGID mantiene su estatus como prueba de referencia
internacional, reconocida por la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, 2025) (Rodríguez
Domínguez, y otros, 2021) lo que garantiza su aceptación en certificaciones sanitarias y comercio
internacional.
En relación con las variables operativas, los resultados mostraron diferencias significativas en costo y
tiempo. El ELISA redujo en 48 horas el tiempo de entrega de resultados respecto a la AGID, lo que
representa una ventaja crítica en situaciones de emergencia epidemiológica, programas de vigilancia
rápida o movimientos internacionales de equinos donde se requiere inmediatez. Sin embargo, su costo
promedio (USD 21,51) fue más del doble que el de la AGID (USD 9,36), lo que podría limitar su
aplicación en laboratorios de diagnóstico rutinario con recursos económicos restringidos. Estudios
similares en Argentina y Brasil (Sandrigo, Martínez, Cipolini, Storani, & Espasandin, 2021) (Torres ,
Oliveira , Neves , & Rodrigues Frias , 2024) coinciden en que el factor costo es determinante en la
adopción de ELISA en programas oficiales de control.
Estos resultados sugieren que, si bien ambas pruebas son equivalentes en eficacia diagnóstica, la
decisión operativa debe considerar el contexto epidemiológico y económico.
En consecuencia, la elección entre AGID y ELISA dependerá del contexto operativo: la AGID como
método confirmatorio oficial y costo-efectivo, y el ELISA como prueba de cribado rápida en escenarios
que demandan inmediatez.
DISCUSIÓN
El presente estudio evidenció que tanto la inmunodifusión en gel de agar (AGID) como el ensayo
inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) alcanzaron una sensibilidad y especificidad del 100 %,
sin registrar falsos positivos ni negativos. Estos hallazgos son consistentes con estudios internacionales
que han demostrado un alto rendimiento de ambas pruebas en el diagnóstico de la anemia infecciosa
equina (AIE). (Villa-Mancera , y otros, 2024) reportaron concordancia perfecta entre AGID y ELISA
en poblaciones equinas de México, mientras que (Domínguez-Odio, Bedoya Ríos, & Cala Delgado,
2025) documentaron índices κ superiores a 0,9 en escenarios de endemicidad.
La concordancia diagnóstica perfecta (κ = 1,0) encontrada en este trabajo respalda la posibilidad de
utilizar las dos pruebas de manera complementaria o intercambiable en condiciones de laboratorio
controladas. No obstante, debe subrayarse que la AGID mantiene su estatus como prueba de referencia
internacional, reconocida por la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, 2025) (Rodríguez
Domínguez, y otros, 2021) lo que garantiza su aceptación en certificaciones sanitarias y comercio
internacional.
En relación con las variables operativas, los resultados mostraron diferencias significativas en costo y
tiempo. El ELISA redujo en 48 horas el tiempo de entrega de resultados respecto a la AGID, lo que
representa una ventaja crítica en situaciones de emergencia epidemiológica, programas de vigilancia
rápida o movimientos internacionales de equinos donde se requiere inmediatez. Sin embargo, su costo
promedio (USD 21,51) fue más del doble que el de la AGID (USD 9,36), lo que podría limitar su
aplicación en laboratorios de diagnóstico rutinario con recursos económicos restringidos. Estudios
similares en Argentina y Brasil (Sandrigo, Martínez, Cipolini, Storani, & Espasandin, 2021) (Torres ,
Oliveira , Neves , & Rodrigues Frias , 2024) coinciden en que el factor costo es determinante en la
adopción de ELISA en programas oficiales de control.
Estos resultados sugieren que, si bien ambas pruebas son equivalentes en eficacia diagnóstica, la
decisión operativa debe considerar el contexto epidemiológico y económico.
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En Ecuador, donde Agrocalidad mantiene la AGID como prueba oficial, los resultados de este estudio
aportan evidencia científica que respalda la incorporación del ELISA como herramienta
complementaria, particularmente útil en tamizajes masivos o en la certificación rápida de animales
destinados a comercio exterior. En Argentina (Alvarez, Cipolini, Wigdorovitz, Trono, & Barrandeguy,
2015) comprobó la eficiencia de la prueba de ELISA, al permitir la identificación de un mayor número
de animales positivos en comparación con AGID. Esto coincide con los programas de control y
erradicación de la Anemia Infecciosa Equina implementados en Ecuador .
En síntesis, la evidencia obtenida respalda la implementación de un esquema diagnóstico combinado,
en el que el ELISA se utilice como prueba de cribado inicial por su rapidez y capacidad de
procesamiento, y la AGID como prueba confirmatoria por su menor costo y reconocimiento oficial.
Este enfoque optimizaría la vigilancia epidemiológica, permitiría decisiones sanitarias oportunas y
fortalecería los programas nacionales de control de AIE en Ecuador.
CONCLUSIONES
El presente estudio demuestra que la inmunodifusión en gel de agar (AGID) y el ELISA poseen un
desempeño diagnóstico equivalente en la detección de anemia infecciosa equina, alcanzando
concordancia absoluta y garantizando confiabilidad bajo condiciones controladas. Sin embargo, las
diferencias observadas en los aspectos operativos revelan que la elección de la técnica no debe
fundamentarse únicamente en su precisión, sino en la relación costo–tiempo y en las necesidades del
contexto epidemiológico.
El ELISA, al reducir en 48 horas el tiempo de entrega de resultados, ofrece una ventaja decisiva en
situaciones de urgencia sanitaria o en programas de tamizaje masivo, mientras que la AGID se mantiene
como una alternativa confirmatoria costo-efectiva y reconocida internacionalmente, lo que asegura su
utilidad en diagnósticos rutinarios y en procesos de certificación.
Sobre esta base, se plantea que un esquema diagnóstico combinado, donde el ELISA funcione como
prueba de cribado inicial y la AGID como confirmatoria, constituye la estrategia más coherente para
fortalecer la vigilancia epidemiológica equina y asegurar el cumplimiento de normativas
internacionales.
En Ecuador, donde Agrocalidad mantiene la AGID como prueba oficial, los resultados de este estudio
aportan evidencia científica que respalda la incorporación del ELISA como herramienta
complementaria, particularmente útil en tamizajes masivos o en la certificación rápida de animales
destinados a comercio exterior. En Argentina (Alvarez, Cipolini, Wigdorovitz, Trono, & Barrandeguy,
2015) comprobó la eficiencia de la prueba de ELISA, al permitir la identificación de un mayor número
de animales positivos en comparación con AGID. Esto coincide con los programas de control y
erradicación de la Anemia Infecciosa Equina implementados en Ecuador .
En síntesis, la evidencia obtenida respalda la implementación de un esquema diagnóstico combinado,
en el que el ELISA se utilice como prueba de cribado inicial por su rapidez y capacidad de
procesamiento, y la AGID como prueba confirmatoria por su menor costo y reconocimiento oficial.
Este enfoque optimizaría la vigilancia epidemiológica, permitiría decisiones sanitarias oportunas y
fortalecería los programas nacionales de control de AIE en Ecuador.
CONCLUSIONES
El presente estudio demuestra que la inmunodifusión en gel de agar (AGID) y el ELISA poseen un
desempeño diagnóstico equivalente en la detección de anemia infecciosa equina, alcanzando
concordancia absoluta y garantizando confiabilidad bajo condiciones controladas. Sin embargo, las
diferencias observadas en los aspectos operativos revelan que la elección de la técnica no debe
fundamentarse únicamente en su precisión, sino en la relación costo–tiempo y en las necesidades del
contexto epidemiológico.
El ELISA, al reducir en 48 horas el tiempo de entrega de resultados, ofrece una ventaja decisiva en
situaciones de urgencia sanitaria o en programas de tamizaje masivo, mientras que la AGID se mantiene
como una alternativa confirmatoria costo-efectiva y reconocida internacionalmente, lo que asegura su
utilidad en diagnósticos rutinarios y en procesos de certificación.
Sobre esta base, se plantea que un esquema diagnóstico combinado, donde el ELISA funcione como
prueba de cribado inicial y la AGID como confirmatoria, constituye la estrategia más coherente para
fortalecer la vigilancia epidemiológica equina y asegurar el cumplimiento de normativas
internacionales.
pág. 6463
No obstante, se identifican áreas que requieren mayor investigación, como la evaluación del desempeño
de ambas pruebas en escenarios de campo, con animales en fases tempranas de infección o en presencia
de coinfecciones, lo que permitirá ampliar la aplicabilidad de estos hallazgos en la práctica sanitaria
real.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Agrocalidad. (20 de jULIO de 2016). Resolución 0267. MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA
LA PREVENCIÓN Y CONTROL DE LA ANEMIA INFECCIOSA EQUINA EN EL
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Procedimientos-para-la-Prevencion-y-Control-de-la-Anemia-Infecciosa-Equina-en-el-
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Domínguez-Odio, A., Bedoya Ríos, M. Á., & Cala Delgado, D. (Enero de 2025). Producción científica
internacional sobre el diagnóstico de Anemia Infecciosa Equina. Revista MVZ Córdova, 30(1),
1-9. doi: https://doi.org/10.21897/rmvz.3573
No obstante, se identifican áreas que requieren mayor investigación, como la evaluación del desempeño
de ambas pruebas en escenarios de campo, con animales en fases tempranas de infección o en presencia
de coinfecciones, lo que permitirá ampliar la aplicabilidad de estos hallazgos en la práctica sanitaria
real.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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LA PREVENCIÓN Y CONTROL DE LA ANEMIA INFECCIOSA EQUINA EN EL
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