BIOLOGÍA MOLECULAR UNA
ALTERNATIVA DIAGNÓSTICA EFICAZ EN
EL ESTUDIO DE LA GEOHELMINTOSIS
MOLECULAR BIOLOGY: AN EFFECTIVE DIAGNOSTIC
ALTERNATIVE IN THE STUDY OF GEOHELMINTHIASIS
Diana Carolina González-Palacios
Universidad Técnica de Ambato, Ecuador
José Roberto Hernández Caicedo
Universidad Técnica de Ambato, Ecuador
pág. 5795
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i6.21689
Biología Molecular una Alternativa Diagnóstica Eficaz en el Estudio de la
Geohelmintosis
Diana Carolina González-Palacios1
dc.gonzalez@uta.edu.ec,
https://orcid.org/0000-0002-9550-2884
Universidad Técnica de Ambato, Facultad
Ciencias de la Salud. Ambato, Ecuador.
José Roberto Hernández Caicedo
hernandezcjoser@gmail.com
https://orcid.org/0000-0001-6366-6449
Universidad Técnica de Ambato
Ambato - Ecuador
RESUMEN
La identificación de parasitosis desatendidas ha sido un importante problema de salud pública debido a
su bajo límite de detección con metodología tradicional. El uso de herramientas moleculares en el
diagnóstico ha permitido incrementar el límite de detección otorgando un resultado más certero y
permitiendo la detección temprana de estas infecciones. Bajo este contexto, la presente revisión
bibliográfica plasma las técnicas moleculares utilizadas para la identificación de cinco parasitosis
Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis, Necator americanus,
Strongyloides stercoralis, importantes por su impacto en la población y por su subestimación en
prevalencia
Palabras claves: pcr, detección molecular, ancylostoma duodenale, ascaris lumbricoides,
angiostrongylus cantonensis, necator americanus, strongyloides stercoralis
1 Autor principal
Correspondencia: dc.gonzalez@uta.edu.ec
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i6.21689
Biología Molecular una Alternativa Diagnóstica Eficaz en el Estudio de la
Geohelmintosis
Diana Carolina González-Palacios1
dc.gonzalez@uta.edu.ec,
https://orcid.org/0000-0002-9550-2884
Universidad Técnica de Ambato, Facultad
Ciencias de la Salud. Ambato, Ecuador.
José Roberto Hernández Caicedo
hernandezcjoser@gmail.com
https://orcid.org/0000-0001-6366-6449
Universidad Técnica de Ambato
Ambato - Ecuador
RESUMEN
La identificación de parasitosis desatendidas ha sido un importante problema de salud pública debido a
su bajo límite de detección con metodología tradicional. El uso de herramientas moleculares en el
diagnóstico ha permitido incrementar el límite de detección otorgando un resultado más certero y
permitiendo la detección temprana de estas infecciones. Bajo este contexto, la presente revisión
bibliográfica plasma las técnicas moleculares utilizadas para la identificación de cinco parasitosis
Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis, Necator americanus,
Strongyloides stercoralis, importantes por su impacto en la población y por su subestimación en
prevalencia
Palabras claves: pcr, detección molecular, ancylostoma duodenale, ascaris lumbricoides,
angiostrongylus cantonensis, necator americanus, strongyloides stercoralis
1 Autor principal
Correspondencia: dc.gonzalez@uta.edu.ec
pág. 5796
Molecular Biology: an Effective Diagnostic Alternative in the Study of
Geohelminthiasis
ABSTRACT
The identification of neglected parasitic infections has been a significant public health problem due to
the low detection limit using traditional methods. The use of molecular diagnostic tools has increased
the detection limit, providing more accurate results and enabling the early detection of these
infections. In this context, this literature review presents the molecular techniques used to identify five
parasitic infections: Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis,
Necator americanus, and Strongyloides stercoralis. These infections are important due to their impact
on the population and their underestimated prevalence
Keywords: pcr, molecular detection, ancylostoma duodenale, ascaris lumbricoides, angiostrongylus
cantonensis, necator americanus, strongyloides stercoralis
Artículo recibido 8 noviembre 2025
Aceptado para publicación: 15 diciembre 2025
Molecular Biology: an Effective Diagnostic Alternative in the Study of
Geohelminthiasis
ABSTRACT
The identification of neglected parasitic infections has been a significant public health problem due to
the low detection limit using traditional methods. The use of molecular diagnostic tools has increased
the detection limit, providing more accurate results and enabling the early detection of these
infections. In this context, this literature review presents the molecular techniques used to identify five
parasitic infections: Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis,
Necator americanus, and Strongyloides stercoralis. These infections are important due to their impact
on the population and their underestimated prevalence
Keywords: pcr, molecular detection, ancylostoma duodenale, ascaris lumbricoides, angiostrongylus
cantonensis, necator americanus, strongyloides stercoralis
Artículo recibido 8 noviembre 2025
Aceptado para publicación: 15 diciembre 2025
pág. 5797
INTRODUCCIÓN
Los helmintos transmitidos por el suelo (geohelmintos) se encuentran ampliamente diseminados en
zonas tropicales y subtropicales del mundo, con principal impacto en países en vías de desarrollo donde
es común encontrar áreas desatendidas con medidas deficientes de saneamiento [1], [2]. Según datos de
la OMS, en el mundo hay alrededor de dos mil millones de personas infectadas con geohelmintos [3].
La infección con geohelmintos se ha reportado con mayor prevalencia en niños y población vulnerable.
Las manifestaciones clínicas que presentan este tipo de infestaciones varían entre deficiencia
nutricional, anemia y trastornos intestinales y/o cognitivos. Este tipo de parasitosis pueden mantenerse
asintomáticas por un largo período de tiempo, que a nivel de salud pública repercute en una estimación
irreal de la prevalencia ocasionando la falta de tratamiento oportuno que en casos extremos puede
comprometer la vida del paciente.
Con este antecedente, se resalta la importancia en el uso de métodos de diagnóstico que permitan la
detección oportuna y eficiente de estas parasitosis. Los métodos de parasitología tradicional:
concentración, microscopia y cultivo, han sido ampliamente reportados para el tamizaje poblacional.
Sin embargo, la baja sensibilidad y especificidad reportada con estas técnicas compromete la fidelidad
de los resultados promoviendo la búsqueda de nuevos métodos de diagnóstico [4]–[7]. La aplicación de
tecnología basada en identificación de ADN ha permitido superar estas limitaciones. El uso de un
marcador molecular apropiado y su amplificación mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa
(PCR) se ha posicionado como una alternativa interesante no solo por su alta especificidad y
sensibilidad sino también por su relativo bajo costo [8]–[10].
El objetivo de esta revisión bibliográfica consiste en realizar un compendio de las técnicas moleculares
utilizadas a nivel mundial para la identificación y diagnóstico de cinco parasitosis desatendidas,
destacadas por su importante impacto en salud pública.
METODOLOGÍA
La información científica incluida en este artículo de revisión fue obtenida de la base de datos de US
National Library of Medicine National Institutes of Health, PMC (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pcm/).
Las palabras claves empleadas para limitar la búsqueda fueron: Molecular, detection, diagnosis, PCR,
INTRODUCCIÓN
Los helmintos transmitidos por el suelo (geohelmintos) se encuentran ampliamente diseminados en
zonas tropicales y subtropicales del mundo, con principal impacto en países en vías de desarrollo donde
es común encontrar áreas desatendidas con medidas deficientes de saneamiento [1], [2]. Según datos de
la OMS, en el mundo hay alrededor de dos mil millones de personas infectadas con geohelmintos [3].
La infección con geohelmintos se ha reportado con mayor prevalencia en niños y población vulnerable.
Las manifestaciones clínicas que presentan este tipo de infestaciones varían entre deficiencia
nutricional, anemia y trastornos intestinales y/o cognitivos. Este tipo de parasitosis pueden mantenerse
asintomáticas por un largo período de tiempo, que a nivel de salud pública repercute en una estimación
irreal de la prevalencia ocasionando la falta de tratamiento oportuno que en casos extremos puede
comprometer la vida del paciente.
Con este antecedente, se resalta la importancia en el uso de métodos de diagnóstico que permitan la
detección oportuna y eficiente de estas parasitosis. Los métodos de parasitología tradicional:
concentración, microscopia y cultivo, han sido ampliamente reportados para el tamizaje poblacional.
Sin embargo, la baja sensibilidad y especificidad reportada con estas técnicas compromete la fidelidad
de los resultados promoviendo la búsqueda de nuevos métodos de diagnóstico [4]–[7]. La aplicación de
tecnología basada en identificación de ADN ha permitido superar estas limitaciones. El uso de un
marcador molecular apropiado y su amplificación mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa
(PCR) se ha posicionado como una alternativa interesante no solo por su alta especificidad y
sensibilidad sino también por su relativo bajo costo [8]–[10].
El objetivo de esta revisión bibliográfica consiste en realizar un compendio de las técnicas moleculares
utilizadas a nivel mundial para la identificación y diagnóstico de cinco parasitosis desatendidas,
destacadas por su importante impacto en salud pública.
METODOLOGÍA
La información científica incluida en este artículo de revisión fue obtenida de la base de datos de US
National Library of Medicine National Institutes of Health, PMC (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pcm/).
Las palabras claves empleadas para limitar la búsqueda fueron: Molecular, detection, diagnosis, PCR,
pág. 5798
Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis, Necator americanus,
Strongyloides stercoralis.
Uncinariasis: Ancylostoma duodenale y Necator americanus
La Uncinariasis se encuentra entre las infecciones humanas crónicas de mayor relevancia a nivel
mundial, se estima que aproximadamente 740 millones de personas se encuentran infestadas [11],
siendo los países pobres y en vías de desarrollo los más afectados con aproximadamente 576 millones
de infecciones[12], [13]. Esta condición es causada principalmente por los parásitos intestinales
Ancylostoma duodenale y Necator americanus. El ciclo biológico de estos nematodos se origina a partir
de huevos que maduran en el suelo, los cual se desarrollan a larvas rabditiformes y a larvas filariformes
en condiciones adecuadas. Esta última corresponde a su forma infectante, la cual atraviesa la piel
humana llegan al torrente sanguíneo, alcanza a los pulmones, perfora la cavidad alveolar, asciende por
la tráquea y es deglutida descendiendo hasta el intestino delgado en donde se desarrolla a su estado
adulto adhiriéndose a la pared intestinal y alimentándose del flujo sanguíneo. Esto contribuye al
desarrollo de anemia, déficit de hierro, problemas del corazón, trastornos cognitivos y déficit de
crecimiento, es así que los niños en edad escolar se consideran el grupo más vulnerable dentro de la
Uncinariasis [14], [15]. Esta parasitosis se convierte en la segunda infección parasitaria más importante
después de la malaria, al evaluar el tiempo de invalidez por años de vida en población general [16].
El diagnóstico de Uncinariasis ha dependido tradicionalmente de la detección de huevos en muestras
fecales [17], sin embargo debido a la similitud morfológica entre los huevos de Ancylostoma duodenale
y Necator americanus la diferenciación por microscopía se ve limitada. La importancia de su
identificación para fines epidemiológicos y de tratamiento ha llevado a la aplicación de métodos de
diagnóstico molecular, convirtiéndola en una alternativa efectiva debido a su sensibilidad y
especificidad. Las principales tecnologías moleculares para el diagnóstico de la Uncinariasis son:
Reacción En Cadena De La Polimerasa (PCR)
En 1998 Monti y colaboradores desarrollaron una técnica de diagnóstico para diferenciar N. americanus
y A. duodenale mediante la amplificación de un fragmento del gen ITS-1. Esta técnica mostró un límite
de detección de hasta 10pg de ADN por muestra [18].
Ancylostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, Angiostrongylus cantonensis, Necator americanus,
Strongyloides stercoralis.
Uncinariasis: Ancylostoma duodenale y Necator americanus
La Uncinariasis se encuentra entre las infecciones humanas crónicas de mayor relevancia a nivel
mundial, se estima que aproximadamente 740 millones de personas se encuentran infestadas [11],
siendo los países pobres y en vías de desarrollo los más afectados con aproximadamente 576 millones
de infecciones[12], [13]. Esta condición es causada principalmente por los parásitos intestinales
Ancylostoma duodenale y Necator americanus. El ciclo biológico de estos nematodos se origina a partir
de huevos que maduran en el suelo, los cual se desarrollan a larvas rabditiformes y a larvas filariformes
en condiciones adecuadas. Esta última corresponde a su forma infectante, la cual atraviesa la piel
humana llegan al torrente sanguíneo, alcanza a los pulmones, perfora la cavidad alveolar, asciende por
la tráquea y es deglutida descendiendo hasta el intestino delgado en donde se desarrolla a su estado
adulto adhiriéndose a la pared intestinal y alimentándose del flujo sanguíneo. Esto contribuye al
desarrollo de anemia, déficit de hierro, problemas del corazón, trastornos cognitivos y déficit de
crecimiento, es así que los niños en edad escolar se consideran el grupo más vulnerable dentro de la
Uncinariasis [14], [15]. Esta parasitosis se convierte en la segunda infección parasitaria más importante
después de la malaria, al evaluar el tiempo de invalidez por años de vida en población general [16].
El diagnóstico de Uncinariasis ha dependido tradicionalmente de la detección de huevos en muestras
fecales [17], sin embargo debido a la similitud morfológica entre los huevos de Ancylostoma duodenale
y Necator americanus la diferenciación por microscopía se ve limitada. La importancia de su
identificación para fines epidemiológicos y de tratamiento ha llevado a la aplicación de métodos de
diagnóstico molecular, convirtiéndola en una alternativa efectiva debido a su sensibilidad y
especificidad. Las principales tecnologías moleculares para el diagnóstico de la Uncinariasis son:
Reacción En Cadena De La Polimerasa (PCR)
En 1998 Monti y colaboradores desarrollaron una técnica de diagnóstico para diferenciar N. americanus
y A. duodenale mediante la amplificación de un fragmento del gen ITS-1. Esta técnica mostró un límite
de detección de hasta 10pg de ADN por muestra [18].
pág. 5799
En el 2001 Zhan B. y colaboradores diseñaron un ensayo que amplificaba un fragmento de 500pb del
gen cox1 dentro del mtDNA para identificar entre N. americanus y A. duodenale, está técnica fue
además probada exitosamente en cultivos en estadíos de huevos, larvas y parásitos adultos de estas
Ucinarias [19].
PCR-Fragmento de Restricción de Longitud Polimórfica
Hawdon en 1996 desarrolló un ensayo utilizando como diana un fragmento del gen cAMP, logrando
establecer patrones característicos para la identificación de N. americanus y A. duodenale durante
ensayos preliminares. A pesar de la elevada sensibilidad que presentó esta técnica, presentó una
amplificación poco específica, encontrándose reacciones positivas para otros parásitos dentro de las
Uncinariasis tanto animales como humanas [20]. Años más tarde Demeler y colaboradores
desarrollaron un ensayo sobre el gen ITS-2 para establecer la presencia de N. Americanus y
Ancylostoma spp. en muestras fecales. Con este objetivo se amplificó el gen completo usando un juego
de cebadores comunes en todo el orden estrongiloidae para posteriormente realizar una digestión
enzimática para confirmar la especie. Los resultados permitían una identificación clara de la presencia
de N. Americanus y Ancylostoma spp. con un 100% de sensibilidad al aplicar este protocolo sobre
controles [21].
PCR – Anidada
Bajo esta modalidad se ha analizado extensivamente el gen ITS-2 del ADN ribosomal debido a su alta
variabilidad inter-especie y baja variabilidad intra-especie, lo cual lo hace un candidato óptimo para
establecer identificaciones a nivel de especie y estudios filogenéticos [22]. Estudios basados en este gen
se han desarrollado ampliamente para identificar muestras de la región del norte de Togo y Ghana
logrando establecer una amplia presencia de N. americanus, que incluso alcanzó una prevalencia del
50% en algunas aldeas [23]–[25]. Este gen también ha sido evaluado para establecer diagnósticos
diferenciales entre N. americanus y A. duodenale en muestras de heces humanas en muestras
procedentes de Bolgatanga y Garu al norte de Ghana detectando una prevalencia estimada para A.
duodenale del 19.6%, y del 73.5% para N. americanus dentro de las cuales 16.9% correspondían a
coinfecciones [26]. Utilizando esta misma metodología en muestras procedentes de ocho aldeas del
oeste de Malasia se encontró un 76.6% de muestras positivas para N. americanus, un 12,8% de muestras
En el 2001 Zhan B. y colaboradores diseñaron un ensayo que amplificaba un fragmento de 500pb del
gen cox1 dentro del mtDNA para identificar entre N. americanus y A. duodenale, está técnica fue
además probada exitosamente en cultivos en estadíos de huevos, larvas y parásitos adultos de estas
Ucinarias [19].
PCR-Fragmento de Restricción de Longitud Polimórfica
Hawdon en 1996 desarrolló un ensayo utilizando como diana un fragmento del gen cAMP, logrando
establecer patrones característicos para la identificación de N. americanus y A. duodenale durante
ensayos preliminares. A pesar de la elevada sensibilidad que presentó esta técnica, presentó una
amplificación poco específica, encontrándose reacciones positivas para otros parásitos dentro de las
Uncinariasis tanto animales como humanas [20]. Años más tarde Demeler y colaboradores
desarrollaron un ensayo sobre el gen ITS-2 para establecer la presencia de N. Americanus y
Ancylostoma spp. en muestras fecales. Con este objetivo se amplificó el gen completo usando un juego
de cebadores comunes en todo el orden estrongiloidae para posteriormente realizar una digestión
enzimática para confirmar la especie. Los resultados permitían una identificación clara de la presencia
de N. Americanus y Ancylostoma spp. con un 100% de sensibilidad al aplicar este protocolo sobre
controles [21].
PCR – Anidada
Bajo esta modalidad se ha analizado extensivamente el gen ITS-2 del ADN ribosomal debido a su alta
variabilidad inter-especie y baja variabilidad intra-especie, lo cual lo hace un candidato óptimo para
establecer identificaciones a nivel de especie y estudios filogenéticos [22]. Estudios basados en este gen
se han desarrollado ampliamente para identificar muestras de la región del norte de Togo y Ghana
logrando establecer una amplia presencia de N. americanus, que incluso alcanzó una prevalencia del
50% en algunas aldeas [23]–[25]. Este gen también ha sido evaluado para establecer diagnósticos
diferenciales entre N. americanus y A. duodenale en muestras de heces humanas en muestras
procedentes de Bolgatanga y Garu al norte de Ghana detectando una prevalencia estimada para A.
duodenale del 19.6%, y del 73.5% para N. americanus dentro de las cuales 16.9% correspondían a
coinfecciones [26]. Utilizando esta misma metodología en muestras procedentes de ocho aldeas del
oeste de Malasia se encontró un 76.6% de muestras positivas para N. americanus, un 12,8% de muestras
pág. 5800
positivas para A. ceylanicum (especie identificada por secuenciación), un 10,6% de coinfecciones y
ausencia de A. duodenale. Sin embargo solo el 81% (47 de 58) de las muestras identificadas como
positivas mediante microscopía pudieron ser confirmadas por métodos moleculares, El autor presume
que esto puede deberse a inhibidores presentes durante la PCR o a identificaciones erróneas durante la
microscopía. [27].
HRM - Curvas de disociación de alta resolución
Mediante el uso de esta tecnología se han desarrollado dos trabajos, ambos usando al gen ITS-2 como
diana, para realizar la detección de Uncinarias. El ensayo de Ngui en el 2012 permitió la identificación
de N. americanus, A. duodenale, A. ceylanicum, A caninum y A. brazilense. Mediante el análisis de
controles se logró establecer una elevada sensibilidad y especificidad de esta técnica, misma que
permitió incluso la identificación de infecciones múltiples [9]. Demeler y colaboradores desarrollaron
un protocolo basado en el mismo gen, logrando resultados satisfactorios para la identificación de N.
americanus y Ancylostoma spp. Todas las muestras evaluadas correspondieron a controles positivos
donde solo una muestra positiva para N. americanus presentó una curva de denaturación con una ligera
desviación hacia una temperatura mayor pero manteniendo su misma forma, este particular para los
autores no consistió en un motivo para desestimar la técnica a pesar que no se ofrece una explicación a
este evento [21].
PCR – Tiempo real
Esta variación de la técnica para amplificación de material genético por reacción en cadena de la
polimerasa es sin duda la más difundida para el diagnóstico de Uncinarias. Todos los ensayos
desarrollados para esta tecnología se han centrado en la detección del gen ITS-2. En el 2007 Verweij
fue el primero en desarrollar cebadores para la detección de Ancylostoma duodenale, Necator
americanus y Oesophagostomum bifurcum mediante PCR-Tiempo Real. Esta técnica altamente
sensible mostró una fuerte correlación entre carga parasitaria por Kato-Katz y el valor de límite de ciclo
de cada muestra. Además fue utilizada para el análisis de muestras de heces provenientes del norte de
Ghana, de donde se estableció una prevalencia del 88.5% de muestras positivas para N. americanus,
6.8% de muestras positivas para A. duodenale y 30.4% para O. bifurcum, dentro de estos resultados el
6.2% correspondió a co-infecciones de N. americanus y A. duodenale y un 29.8% a co-infecciones entre
positivas para A. ceylanicum (especie identificada por secuenciación), un 10,6% de coinfecciones y
ausencia de A. duodenale. Sin embargo solo el 81% (47 de 58) de las muestras identificadas como
positivas mediante microscopía pudieron ser confirmadas por métodos moleculares, El autor presume
que esto puede deberse a inhibidores presentes durante la PCR o a identificaciones erróneas durante la
microscopía. [27].
HRM - Curvas de disociación de alta resolución
Mediante el uso de esta tecnología se han desarrollado dos trabajos, ambos usando al gen ITS-2 como
diana, para realizar la detección de Uncinarias. El ensayo de Ngui en el 2012 permitió la identificación
de N. americanus, A. duodenale, A. ceylanicum, A caninum y A. brazilense. Mediante el análisis de
controles se logró establecer una elevada sensibilidad y especificidad de esta técnica, misma que
permitió incluso la identificación de infecciones múltiples [9]. Demeler y colaboradores desarrollaron
un protocolo basado en el mismo gen, logrando resultados satisfactorios para la identificación de N.
americanus y Ancylostoma spp. Todas las muestras evaluadas correspondieron a controles positivos
donde solo una muestra positiva para N. americanus presentó una curva de denaturación con una ligera
desviación hacia una temperatura mayor pero manteniendo su misma forma, este particular para los
autores no consistió en un motivo para desestimar la técnica a pesar que no se ofrece una explicación a
este evento [21].
PCR – Tiempo real
Esta variación de la técnica para amplificación de material genético por reacción en cadena de la
polimerasa es sin duda la más difundida para el diagnóstico de Uncinarias. Todos los ensayos
desarrollados para esta tecnología se han centrado en la detección del gen ITS-2. En el 2007 Verweij
fue el primero en desarrollar cebadores para la detección de Ancylostoma duodenale, Necator
americanus y Oesophagostomum bifurcum mediante PCR-Tiempo Real. Esta técnica altamente
sensible mostró una fuerte correlación entre carga parasitaria por Kato-Katz y el valor de límite de ciclo
de cada muestra. Además fue utilizada para el análisis de muestras de heces provenientes del norte de
Ghana, de donde se estableció una prevalencia del 88.5% de muestras positivas para N. americanus,
6.8% de muestras positivas para A. duodenale y 30.4% para O. bifurcum, dentro de estos resultados el
6.2% correspondió a co-infecciones de N. americanus y A. duodenale y un 29.8% a co-infecciones entre
pág. 5801
N. americanus y O. bifurcum [28]. Posteriormente otros autores usaron estos mismos cebadores para
sus estudios, entre ellos destaca Basuni y colaboradores quienes en el 2011 desarrolló una PCR
Multiplex en Tiempo real para la detección de cuatro parásitos más un control negativo (A.
Lumbricoides, S. Stercolaris, A. duodenale, N. americanus y Herpes-virus porcino respectivamente).
Esta aplicación mostró ser altamente específica y sensible, y posteriormente fue aplicada en el
procesamiento de 225 muestras fecales procedentes del Hospital Universiti Sains Malaysia (HUSM), la
estimación obtenida fue del 15.1% de muestras positivas para Uncinarias (N. Americanus y A.
duodenale con el 8.9% y 6.2% respectivamente) siendo esta la parasitosis más común detectada según
este estudio. La técnica permitió un incremento de 6.6 veces más en la detección de helmintos en
relación a estudios microscópicos [8], [29].
Jonker y colaboradores en el 2012 utilizando los mismos cebadores desarrollados por Verweij en el
2007 lograron establecer la prevalencia de N. americanus y A. duodenale en niños de 6 a 60 meses
desde el 2002 hasta el 2004 en regiones urbanas y rurales del Sur de Malawi. En donde el 26.1% y el
4.9% de las muestras fueron positivas para A. duodenale y N. americanus respectivamente. [30]. Mejía
y colaboradores mediante estas mismas secuencias procesaron 400 muestras de heces de niños de 13
meses de edad y 125 muestras de niños de entre 8 a 14 años. La población estudiada correspondió al
distrito de Quinindé, provincia de Esmeraldas en Ecuador, únicamente dos niños de 13 meses de edad
resultaron positivos para A. duodenale [31]. Estos mismos cebadores fueron utilizados también por van
Mens y colaboradores en el 2013 en muestras de heces de niños procedentes de zonas rurales y urbanas
del Sur de Ghana en edad escolar. Se confirmó por biología molecular el 96% de los casos
diagnosticados previamente por microscopía para la presencia de N. Americanus, adicionalmente se
pudieron detectar 20 casos positivos para este nematodo en muestras que habían sido descartadas por
microscopía. No se reportó ningún caso de A. duodenale [32].
En el 2012 Wang y colaboradores desarrollaron basados en el mismo gen, un ensayo para PCR-Tiempo
Real para evaluar exclusivamente N. americanus a partir de muestras de heces humanas. Mediante esta
técnica se logró detectar una prevalencia de 22.69% de positivos contra el 13.89% de positivos mediante
Kato-Katz y el 16.2% de positivos conseguido mediante PCR convencional usando el mismo juego de
cebadores. Destacando así la alta sensibilidad de la técnica [33].
N. americanus y O. bifurcum [28]. Posteriormente otros autores usaron estos mismos cebadores para
sus estudios, entre ellos destaca Basuni y colaboradores quienes en el 2011 desarrolló una PCR
Multiplex en Tiempo real para la detección de cuatro parásitos más un control negativo (A.
Lumbricoides, S. Stercolaris, A. duodenale, N. americanus y Herpes-virus porcino respectivamente).
Esta aplicación mostró ser altamente específica y sensible, y posteriormente fue aplicada en el
procesamiento de 225 muestras fecales procedentes del Hospital Universiti Sains Malaysia (HUSM), la
estimación obtenida fue del 15.1% de muestras positivas para Uncinarias (N. Americanus y A.
duodenale con el 8.9% y 6.2% respectivamente) siendo esta la parasitosis más común detectada según
este estudio. La técnica permitió un incremento de 6.6 veces más en la detección de helmintos en
relación a estudios microscópicos [8], [29].
Jonker y colaboradores en el 2012 utilizando los mismos cebadores desarrollados por Verweij en el
2007 lograron establecer la prevalencia de N. americanus y A. duodenale en niños de 6 a 60 meses
desde el 2002 hasta el 2004 en regiones urbanas y rurales del Sur de Malawi. En donde el 26.1% y el
4.9% de las muestras fueron positivas para A. duodenale y N. americanus respectivamente. [30]. Mejía
y colaboradores mediante estas mismas secuencias procesaron 400 muestras de heces de niños de 13
meses de edad y 125 muestras de niños de entre 8 a 14 años. La población estudiada correspondió al
distrito de Quinindé, provincia de Esmeraldas en Ecuador, únicamente dos niños de 13 meses de edad
resultaron positivos para A. duodenale [31]. Estos mismos cebadores fueron utilizados también por van
Mens y colaboradores en el 2013 en muestras de heces de niños procedentes de zonas rurales y urbanas
del Sur de Ghana en edad escolar. Se confirmó por biología molecular el 96% de los casos
diagnosticados previamente por microscopía para la presencia de N. Americanus, adicionalmente se
pudieron detectar 20 casos positivos para este nematodo en muestras que habían sido descartadas por
microscopía. No se reportó ningún caso de A. duodenale [32].
En el 2012 Wang y colaboradores desarrollaron basados en el mismo gen, un ensayo para PCR-Tiempo
Real para evaluar exclusivamente N. americanus a partir de muestras de heces humanas. Mediante esta
técnica se logró detectar una prevalencia de 22.69% de positivos contra el 13.89% de positivos mediante
Kato-Katz y el 16.2% de positivos conseguido mediante PCR convencional usando el mismo juego de
cebadores. Destacando así la alta sensibilidad de la técnica [33].
pág. 5802
Ascariasis: Ascaris lumbricoides
Ascariasis es la helmintiasis intestinal más frecuente en el mundo, aproximadamente 1,4 billones de
personas están infectadas, sobre todo en África, Latinoamérica y zonas de Asia[34]. En Ecuador hasta
el 63% de personas estarían infestadas especialmente en áreas tropicales y rurales según un estudio
realizado por Cooper y colaboradores en el 2003 en escuelas rurales de las provincias de Pichincha y
Esmeraldas [35]. La distribución del parásito está ampliamente diseminada en áreas tropicales donde
las personas acostumbran defecar a ras del suelo, los huevos depositados con las heces maduran a su
forma infectante bajo condiciones de humedad y temperatura adecuadas. Los huevos al ser ingeridos
por el hombre ingresan al tubo digestivo donde se produce su eclosión a larvas que atraviesan la mucosa
intestinal, alcanza la circulación y posteriormente llegan a los pulmones, y desde ahí invaden los
alveolos pulmonares pasando a los bronquios. Mediante la tos y la deglución reaparecen en el intestino
delgado transformados en adultos, tiempo durante el cual dan lugar a la excreción de huevos en heces,
iniciando el ciclo nuevamente.
PCR-Fragmentos de Restricción de Longitud Polimórfica.
Ascaris suum y Ascaris lumbricoides, constituyen dos especies diferentes, pero estrechamente
relacionadas. Zhu y colaboradores (1998), caracterizaron Ascaris lumbricoides de muestras colectadas
en fase adulta de pacientes humanos tratados con antihelmínticos, y Ascaris suum de porcinos
sacrificados. La secuencia ITS-1 de la región ribosomal (rDNA) fue amplificada mediante la técnica
PCR-Polimorfismos de Longitud de Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP). Los productos de la
amplificación fueron digeridos con HaeIII para muestras de pacientes humanos, obteniendo patrones
de restricción específicos que permitieron una diferenciación de estos parásitos [36], [37].
PCR-Tiempo Real
En el año 2011 se reporta el primer trabajo de aplicación de PCR–tiempo real para el diagnóstico de A.
lumbricoides en muestras biológicas. Basuni y colaboradores diseñaron una pentaplex PCR en tiempo
real para el diagnóstico de cuatro parásitos entre los que se incluyó a Ascaris lumbricoides. La
amplificación de un fragmento del gen ITS1 de éste parásito reportó una mayor sensibilidad que la
hallada por métodos de parasitología convencional, un año más tarde se aplicó el mismo protocolo para
el diagnóstico de pacientes que acudieron al Hospital Universiti Sains Maylasia con síntomas de
Ascariasis: Ascaris lumbricoides
Ascariasis es la helmintiasis intestinal más frecuente en el mundo, aproximadamente 1,4 billones de
personas están infectadas, sobre todo en África, Latinoamérica y zonas de Asia[34]. En Ecuador hasta
el 63% de personas estarían infestadas especialmente en áreas tropicales y rurales según un estudio
realizado por Cooper y colaboradores en el 2003 en escuelas rurales de las provincias de Pichincha y
Esmeraldas [35]. La distribución del parásito está ampliamente diseminada en áreas tropicales donde
las personas acostumbran defecar a ras del suelo, los huevos depositados con las heces maduran a su
forma infectante bajo condiciones de humedad y temperatura adecuadas. Los huevos al ser ingeridos
por el hombre ingresan al tubo digestivo donde se produce su eclosión a larvas que atraviesan la mucosa
intestinal, alcanza la circulación y posteriormente llegan a los pulmones, y desde ahí invaden los
alveolos pulmonares pasando a los bronquios. Mediante la tos y la deglución reaparecen en el intestino
delgado transformados en adultos, tiempo durante el cual dan lugar a la excreción de huevos en heces,
iniciando el ciclo nuevamente.
PCR-Fragmentos de Restricción de Longitud Polimórfica.
Ascaris suum y Ascaris lumbricoides, constituyen dos especies diferentes, pero estrechamente
relacionadas. Zhu y colaboradores (1998), caracterizaron Ascaris lumbricoides de muestras colectadas
en fase adulta de pacientes humanos tratados con antihelmínticos, y Ascaris suum de porcinos
sacrificados. La secuencia ITS-1 de la región ribosomal (rDNA) fue amplificada mediante la técnica
PCR-Polimorfismos de Longitud de Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP). Los productos de la
amplificación fueron digeridos con HaeIII para muestras de pacientes humanos, obteniendo patrones
de restricción específicos que permitieron una diferenciación de estos parásitos [36], [37].
PCR-Tiempo Real
En el año 2011 se reporta el primer trabajo de aplicación de PCR–tiempo real para el diagnóstico de A.
lumbricoides en muestras biológicas. Basuni y colaboradores diseñaron una pentaplex PCR en tiempo
real para el diagnóstico de cuatro parásitos entre los que se incluyó a Ascaris lumbricoides. La
amplificación de un fragmento del gen ITS1 de éste parásito reportó una mayor sensibilidad que la
hallada por métodos de parasitología convencional, un año más tarde se aplicó el mismo protocolo para
el diagnóstico de pacientes que acudieron al Hospital Universiti Sains Maylasia con síntomas de