ESTABLECIMIENTO DE UN BANCO DE
GERMOPLASMA PARA PRODUCCIÓN
COMERCIAL DE HUITLACOCHE
ESTABLISHMENT OF A GERMPLASM BANK FOR THE
COMMERCIAL PRODUCTION OF HUITLACOCHE
Adriana Reyes Castro
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida – México
Pedro Antonio Rodríguez Salazar
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida – México
Abraham Juarez de la Cruz
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida – México
Hugo Rodriguez Romero
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida – México
Laura Rodríguez Peláez
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida – México
Manuel González-Pérez
Universidad Tecnológica de Tecamachalco. Ingeniería en Agricultura Sustentable y
Protegida Enlace – CONAHCYT - México

pág. 8160
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i6.21951
Establecimiento de un banco de germoplasma para producción comercial
de huitlacoche
Adriana Reyes Castro1
adriana.rc@personal.uttecam.edu.mx
https://orcid.org/0009-0001-0863-7239
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
México
Pedro Antonio Rodríguez Salazar
pedro.rs@personal.uttecam.edu.mx
https://orcid.org/0009-0001-4373-4237
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
México
Abraham Juarez de la Cruz
abraham.jc@personal.uttecam.edu.mx
https://orcid.org/0009-0001-7605-8116
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
México
Hugo Rodriguez Romero
rodriguez6cheyz@gmail.com
https://orcid.org/0009-0003-2466-4928
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
México
Laura Rodríguez Peláez
lau7mx@hotamail.com
https://orcid.org/0009-0007-1349-5347
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
México
Manuel González-Pérez
m.gonzalez.perez@personal.uttecam.edu.mx
http://orcid.org/0000-0001-8700-2866
Universidad Tecnológica de Tecamachalco.
Ingeniería en Agricultura Sustentable y Protegida
Enlace - CONAHCYT
México
RESUMEN
El huitlacoche (Ustilago maydis) es un hongo comestible de alto valor gastronómico y económico, cuya
producción comercial requiere el uso de cepas viables y bien caracterizadas. El objetivo de este estudio
fue establecer un banco de germoplasma de U. maydis a partir de aislamientos obtenidos de agallas de
maíz, con el fin de contar con material biológico confiable para su uso en procesos de producción
controlada. Para ello, se realizaron aislamientos en medios de cultivo selectivos y se evaluaron las
características macroscópicas y microscópicas de las colonias en su fase levaduriforme. Los cultivos
obtenidos presentaron morfología colonial de tipo crema, lisa, convexa y de consistencia cremosa, así
como células ovaladas con gemación multipolar, lo que coincide plenamente con la descripción clásica
de U. maydis. Los aislamientos confirmados fueron integrados a un banco de germoplasma, donde se
conservaron mediante métodos de almacenamiento a largo plazo, asegurando su viabilidad y estabilidad.
En total, se establecieron 4 cepas puras, cada una debidamente registrada y codificada. Los resultados
demuestran que es posible obtener y conservar eficientemente cepas de U. maydis para fines
productivos, contribuyendo al desarrollo de estrategias para la producción comercial de huitlacoche y
fortaleciendo la disponibilidad de recursos genéticos para investigaciones futuras.
Palabras clave: hongo, huitlacoche, identificación, aislamiento
1 Autor Principal
Correspondencia: adriana.rc@personal.uttecam.edu.mx

pág. 8161
Establishment of a germplasm bank for the commercial production of
huitlacoche
ABSTRACT
Huitlacoche (Ustilago maydis) is an edible fungus of high gastronomic and economic value, whose
commercial production requires viable and well-characterized strains. The objective of this study was
to establish a germplasm bank of U. maydis from isolates obtained from corn galls, to provide reliable
biological material for controlled production processes. To this end, isolates were made on selective
culture media, and the macroscopic and microscopic characteristics of the colonies in their yeast phase
were evaluated. The resulting cultures exhibited a cream-like, smooth, convex colonial morphology with
a creamy consistency, as well as oval cells with multipolar budding, fully coinciding with the classic
description for U. maydis. The confirmed isolates were integrated into a germplasm bank, where they
were preserved using long-term storage methods to ensure their viability and stability. In total, four pure
strains were established, each duly registered and coded. The results demonstrate that it is possible to
efficiently obtain and conserve U. maydis strains for productive purposes, contributing to the
development of strategies for the commercial production of huitlacoche and strengthening the
availability of genetic resources for future research.
Keywords: Fungus, huitlacoche, identification, isolation
Artículo recibido 10 diciembre 2025
Aceptado para publicación: 10 enero 2026

pág. 8162
INTRODUCCIÓN
Ustilago maydis, conocido como huitlacoche, es un hongo fitopatógeno dimórfico que infecta maíz (Zea
mays), formando agallas en mazorcas, hojas y tallos. Estas agallas contienen teliosporas negras maduras
y son apreciadas tanto por su valor nutricional como por sus compuestos bioactivos con propiedades
antioxidantes y antimicrobianas (Villagrán et al., 2023). La producción controlada de huitlacoche
permite convertir un hongo fitopatógeno en un producto de alto valor, pero enfrenta retos como la
variabilidad genética y morfológica entre cepas de Ustilago maydis y la escasa caracterización de cepas
locales (Peña Olvera & Maimone Celorio, 2022).
La virulencia de Ustilago maydis depende de la cepa, de la susceptibilidad del maíz y de las condiciones
ambientales, especialmente de temperaturas moderadas y de alta humedad relativa. Estudios recientes
confirman que, durante la infección y el desarrollo del huitlacoche, temperaturas entre 16 °C y 32 °C,
combinadas con humedad elevada, favorecen la formación de agallas y una producción óptima del
hongo (Suastegui-Cruz et al., 2024).
La producción de huitlacoche podría constituir una fuente adicional de ingresos para los agricultores,
impulsar la economía local y generar empleo. Actualmente, su valor gastronómico y nutracéutico ha
llevado a un aumento de su consumo tanto en México como a nivel internacional. Este cambio ha
impulsado la investigación sobre producción controlada, considerando factores como la selección de
cepas y las condiciones ambientales necesarias para inducir la formación de agallas, ya que la
producción natural no es suficiente para cubrir la demanda creciente (Villagrán et al., 2023).
A pesar de su importancia biológica y económica, existe escasa información sobre la diversidad y
características morfológicas de las cepas nativas de U. maydis en regiones específicas como
Tecamachalco, Puebla. Esta falta de conocimiento limita la comprensión de su comportamiento local,
su variabilidad genética y su relación con las condiciones agroecológicas de la zona. En consecuencia,
se dificulta tanto el manejo del cultivo de maíz para evitar pérdidas por infecciones no deseadas, como
el desarrollo de estrategias para la producción controlada de huitlacoche de calidad comercial.
La región de Tecamachalco se caracteriza por ser una zona agrícola de relevancia para la producción de
maíz. Ante este panorama, resulta necesario establecer un banco de germoplasma de Ustilago maydis
para producción comercial de huitlacoche

pág. 8163
Este estudio contribuirá al fortalecimiento de la producción controlada de huitlacoche y a la generación
de información que apoye la toma de decisiones en el manejo del cultivo de maíz a nivel regional.
Estado del arte
(Yu et al., 2023) Revisaron y discutieron la patogenicidad de U. Maydis, los metabolitos implicados en
el proceso patogénico, y la biosíntesis de estos metabolitos. Concluyeron que el ciclo de vida dimórfico
del carbón de los cultivos está naturalmente relacionado con los apresorios de la superficie del maíz a la
formación de nuevas esporas en la formación de tumores.
(Ferris & Walbot, 2021) Desarrollaron un modelo metabólico a escala genómica (iUma22) que permite
simular el crecimiento y la actividad metabólica de U. maydis y se ha convertido en una herramienta
para optimizar el cultivo y comprender las necesidades nutricionales de distintas cepas.
(Villagrán et al., 2023) Revisaron y discutieron la importancia biocultural, el contenido nutricional, el
perfil fitoquímico, las propiedades biológicas del huitlacoche, para contribuir a la seguridad alimentaria
mundial mediante la diversificación alimentaria. Además de los usos biotecnológicos, con el fin de
contribuir al uso, a la propagación y a la conservación de este valioso, pero poco conocido, recurso
fúngico. De la revisión resaltan la importancia cultural, nutricional y biotecnológica del huitlacoche,
destacando su valor como recurso agroalimentario y fuente de compuestos bioactivos.
(Macuil-Tlachino et al., 2021) Aislaron esporidias infectivas a partir de huitlacoche nativo de la región
de Cholula, Puebla, México. Obtuvieron 2 cepas (e7 y e11) infectivas nativas, y un heterocarión
(e14xCP-437) infectivo nativo cruzado con uno extranjero. En su estudio ellos obtuvieron dos cepas
nativas infecciosas (e7 y e11) y un heterocarionte nativo infeccioso (e14xCP-437) cruzado con uno
foráneo. La cuantificación de esporidios se evidenció en un medio líquido de malta a una longitud de
onda de 292 nm.
(Tello-Salgado et al., 2024) Desarrollaron una metodología para obtener cepas unicelulares de U. maydis
con una doble carga genética (n + n) capaces de producir agallas en las mazorcas. Ellos en su estudio
generaron una metodología para aislar cepas con doble carga genética que podrían ser útiles para la
producción de huitlacoche al interrumpir su ciclo de vida.
(Suastegui-Cruz et al., 2024) evaluaron dos parcelas contiguas: el sistema de milpa tradicional (SMT) y
la milpa que integra la producción controlada de agallas de huitlacoche (SMT + Huitlacoche). Ellos

pág. 8164
demostraron que las altas temperaturas durante el período seco no afectaron el desarrollo del huitlacoche
ni de otros productos alimenticios, lo que permitió un mejor aprovechamiento de los subproductos de la
parcela.
(Báez Gómez E. 2023) evaluó la susceptibilidad de dos maíces híbridos a la inducción artificial de
Ustilago maydis. En su estudio, se realizaron inoculaciones controladas en campo para determinar el
nivel de infección y la respuesta de los híbridos ante la presencia del patógeno. Los resultados
demostraron diferencias significativas en la incidencia y desarrollo de agallas entre los genotipos, lo que
sugiere que la compatibilidad entre la cepa del hongo y el material vegetal influye directamente en la
eficiencia de infección y en el potencial de producción de huitlacoche.
(Hernández Castañeda, 2023) destaca que la producción de huitlacoche (Ustilago maydis) depende de
factores como la variedad de maíz, las condiciones ambientales y la calidad del inóculo. Su estudio se
centró en aislar y cultivar cepas heterocarióticas del hongo, evaluar su patogenicidad y sus características
morfológicas, y aportar información clave para optimizar la producción controlada de agallas en maíz.
(Iñiguez-Romero et al., 2024) Caracterizaron cepas de Ustilago maydis mediante PCR de los genes Pra
y Bw, identificando alelos sexuales y compatibilidad entre cepas. Este estudio, realizado con muestras
de Puebla, aporta información clave sobre la diversidad genética del hongo y su potencial para la
producción controlada de huitlacoche.
Peña Olvera y Maimone Celorio (2022) aislaron cepas infectivas de Ustilago maydis de huitlacoche
nativo en Puebla y demostraron su alta patogenicidad y adaptabilidad. En su estudio resaltaron la
importancia de utilizar cepas locales para optimizar la producción controlada de huitlacoche y mejorar
su calidad como alimento funcional.
METODOLOGÍA
El presente estudio es de tipo experimental y descriptivo, ya que se establecieron condiciones
controladas para el manejo y evaluación de las 4 cepas de Ustilago maydis, manipulando variables como
el medio de cultivo y las técnicas de conservación, con el fin de observar su comportamiento y viabilidad
en el banco de germoplasma. Asimismo, es descriptivo porque se registraron y caracterizaron las
características morfológicas, macroscópicas y microscópicas de las cepas, con el objetivo de documentar
y sistematizar la información que permita su uso futuro en la producción comercial de huitlacoche.

pág. 8165
Material biológico
El material biológico fue recolectado de lugares reconocidos por su producción de huitlacoche, entre
estos; Tlacotepec, San Miguel Zacaola, Lomas de Romero y Huixcolotla, el cual consto de agallas
inmaduras de color blanquecino.
Material vegetativo
Se utilizo un área experimental de 20m de ancho x 25m de largo con 8 camas de siembra con 50cm de
distancia entre camas, y 20cm entre plantas, de las cuales 4 fueron sembradas a una hilera y 4 a doble
hilera con 2 variedades de maíz nativo (Cónico y Chalqueño).
Medios y condiciones para el cultivo de Ustilago maydis
Se utilizo medio de cultivo PDA marca BIOXON en agua purificada y esterilizado a temperatura de
120°C, por 15 minutos en autoclave. Posteriormente, el medio de cultivo se vertió en cajas Petri estériles
mediante una campana de flujo laminar.
Proceso de adaptación de cepas
Para inducir la infección con Ustilago maydis, cada una de las muestras de huitlacoche colectadas de
los distintos lugares fue lavada, desinfectada y desecada para la obtención de teliosporas. Para dichas
operaciones las agallas fueron extraídas con un cuchillo y lavadas para remover polvo superficial y
desinfectadas con una solución de cloro al 1.8%. Posteriormente, fueron escurridas y troceadas en cortes
finos para su secado en estufa a 35 °C durante 12 h. Durante el proceso de secado fue indispensable
remover por un periodo de 2h para conseguir que el secado sea homogéneo. Derivado del movimiento
del material biológico durante el secado, se obtuvieron las teliosporas, las cuales se almacenaron en
placas de vidrio para su posterior uso.
Figura 1. Cepas 1.ª. Inoculación
El hongo seco de cada cepa fue disuelto en agua estéril e inoculado por gravedad en cultivo de maíz

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nativo, cuando los estigmas tenían entre 1.5 y 2 cm de largo. El esquema de inoculación se muestra en
la figura 2. Incluyó: 2 variedades de maíz nativo (Cónico y Chalqueño), 2 tipos de siembra (hilera y
doble hilera), 1 técnica de inoculación (por gravedad) y 4 camas de siembra por variedad.
Figura 2. Esquema de la experimentación en campo
Transcurridos de 15 a 18 días después de la inoculación se observaron muestras de huitlacoche con un
tamaño entre 15 y 20cm.
Figura 3. Muestra de huitlacoche obtenida por inoculación de teliosporas en maíz nativo
Las muestras de huitlacoche fueron acondicionadas para la obtención de teliosporas e inoculadas
nuevamente en el mismo esquema experimental.
Figura 4. Cepas de la 2da. InoculaciónC1H1UTTECAM C2Z1UTTECAM C3Tl1UTTECAM C4L1UTTECAM

pág. 8167
Obtención de Ustilago maydis en su forma levaduriforme
En busca del hongo en su forma levaduriforme, se ocuparon muestras de hongo seco obtenidas de la
segunda inoculación, se prepararon diluciones seriadas hasta 10-5 y se realizó la siembra en superficie,
utilizando como medio de cultivo PDA y dejando incubar por 48 horas.
Figura 5. Placas con siembra en superficie a las 48 horas de incubación
Identificación macroscópica
La identificación macroscópica de Ustilago maydis en su fase levaduriforme se realizó mediante la
observación de las colonias desarrolladas en el medio de cultivo, considerando los siguientes criterios:
colonias de crecimiento rápido, de aspecto levaduriforme, con forma circular y límites bien definidos,
inicialmente de color blanco, tornándose beige pálido conforme avanzó la incubación, lisa y brillante
durante las primeras 24 horas, evolucionando a textura mate y ligeramente rugosa en cultivos más viejos,
colonias convexas a ligeramente elevadas, con un borde de regular y entero, colonias de textura cremosa,
característica de su estado blastospórico, de olor leve, de tipo fúngico, sin olor fermentativo intenso.
Aislamiento de colonias de Ustilago maydis
Se sembraron colonias características por estría cruzada en placas de vidrio con medio de cultivo PDA
y se dejaron reposar durante 48 horas. Posteriormente, se observaron al microscopio para comprobar la
presencia de la morfología típica de las basidiósporas (levaduras). La colonia identificada fue estriada
hasta obtener colonias únicas a partir de una basidióspora.
Identificación microscópica
Para confirmar que la morfología de cada cepa correspondía a la de Ustilago maydis. Se realizaron
montajes rápidos con agua destilada y porciones de colonias.

pág. 8168
RESULTADOS
Aislamientos
A partir de las muestras de huitlacoche recolectadas en campo, se obtuvo un total de 4 aislamientos (ver
figura 6), que mostraron un crecimiento característico del género Ustilago. Los 4 cultivos obtenidos
presentaron crecimiento uniforme y constante durante las primeras 48 horas de incubación, lo que
permitió su posterior evaluación morfológica.
Figura 6. Placas de siembra después del aislamiento
Tabla 1. Identificación macroscópica de cepas
Cepa 1 Cepa 2
Cepa 3
Cepa 4
Identificación microscópica
Las observaciones microscópicas revelaron estructuras celulares compatibles con la morfología de U.
maydis en su fase unicelular.

pág. 8169
Tabla 2. Observaciones microscópicas de cepas
Cepa 1 Cepa 2
Cepa 3 Cepa 4
Tabla 3. Resultados de aislamientos de Ustilago maydis
Código de
aislamiento
Origen Características
macroscópicas
Características
Microscópicas
Método de
conservación
C1HUTTECAM Huixcolotla Colonias
levaduriformes
típicas, de aspecto
algodonoso,
bordes bien
definidos,
redondeados, de
color blanco
cremoso, con el
tiempo se tornan
ligeramente
oscuras, de 2 a
5mm.
Se observaron células
individuales y
algunas en proceso de
gemación,
predominantemente
ovaladas y algunas
redondeadas
(globosas), presentan
tamaños variables,
pero en general son
de tamaño
microscópico típico
de levaduras
Extracto de
levadura y
glicerol

pág. 8170
(aproximadamente 3-
7 μm).
C2ZUTTECAM Zozutla Colonias
levaduriformes
típicas, bordes
bien definidos,
redondeados, de
color marfil, con
el tiempo se
tornan
ligeramente
oscuras, de 2 a 5
mm.
Se observaron
estructuras pequeñas
con forma ovalada o
elipsoidal, en proceso
de gemación, el cual
es característico de la
fase levaduriforme.
Extracto de
levadura y
glicerol
C3TlUTTECAM Tlacotepec Colonias
levaduriformes
típicas, algunas
con aspecto
algodonoso y
otras de aspecto
cremoso y
brillante, bordes
bien definidos,
redondeados, de
color blanco, con
el tiempo se
tornan
ligeramente
oscuras, de 2 a 5
mm.
Se observaron células
en proceso de
gemación o división,
con algunas
agrupaciones
pequeñas que podrían
representar colonias o
células. También se
identificaron
estructuras más
pequeñas y alargadas,
que podrían ser hifas
o pseudohifas.
Extracto de
levadura y
glicerol
C4LUTTECAM Lomas de
Romero
Colonias
levaduriformes
típicas, bordes
bien definidos,
redondeados, de
color marfil, con
el tiempo se
Se observaron
estructuras en forma
de bastones,
distribuidas de
manera irregular por
todo el campo visual;
los cristales se
Extracto de
levadura y
glicerol

pág. 8171
tornan
ligeramente
oscuras,
ligeramente
viscosas, de 2 a
5mm.
encuentran
concentrados en
mayor densidad en la
parte superior.
Las características macroscópicas y microscópicas coincidieron plenamente con la morfología descrita
de Ustilago maydis, confirmando la identidad del aislamiento.
No se observó contaminación por otros hongos o levaduras durante el proceso, lo que aseguró la pureza
de los cultivos utilizados.
Conservación de cepas
Se obtuvieron 4 cepas puras de U. maydis, que se conservaron en extracto de levadura y glicerol a 4 °C.
Cada aislamiento fue registrado con un código que incluyo: el número de cepa según el orden de
obtención, la inicial del lugar de origen de la cepa y el lugar de aislamiento.
CONCLUSIÓN
El presente estudio permitió aislar, identificar y conservar 4 cepas puras de Ustilago maydis,
estableciendo un banco de germoplasma previo orientado a la producción comercial de huitlacoche. La
identificación macroscópica y microscópica confirmó que los aislamientos obtenidos corresponden a la
fase levaduriforme del hongo, lo que coincide plenamente con las características descritas en la
literatura. Esto garantiza la confiabilidad del material biológico incorporado al banco.
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